Fluorescein-HRP-Biotin,荧光素-辣根过氧化物酶-生物素,FITC-HRP-Biotin
Fluorescein-HRP-Biotin,英文别名FITC-HRP-Biotin,中文名称荧光素-辣根过氧化物酶-生物素,是集成荧光素发光单元、辣根过氧化物酶蛋白骨架与生物素识别基团的多功能荧光偶联复合物,同时具备光学信号输出能力、酶催化活性以及生物素-亲和素特异性识别特性,在体外生物传感、分子捕获检测体系构建方面拥有广阔应用空间。荧光素结构激发波长495 nm,发射519 nm荧光信号,可作为直接光学报告基团;辣根过氧化物酶可催化底物发生氧化反应,实现信号放大;生物素单元则提供高特异性分子识别位点。
该复合物依靠生物素与亲和素之间*强的非共价相互作用,实现目标分子的定点捕获。荧光素标记在辣根过氧化物酶蛋白表面合适的氨基酸残基位点,标记位点经过控制,避免大量荧光分子修饰造成蛋白空间构象改变,*大程度保留辣根过氧化物酶的催化活性。荧光基团与酶蛋白骨架之间保持合适距离,减少芳香荧光环对蛋白微环境的干扰,防止酶活性位点失活。整套复合物可在温和水相缓冲体系中稳定分散,无需强有机溶剂,维持蛋白大分子天然空间构象。
该复合物主要用于体外传感检测体系搭建,依托生物素-亲和素识别体系捕获待测分子,一方面可以直接读取荧光素产生的荧光信号,另一方面可以借助辣根过氧化物酶催化底物,生成可检测的光学信号,实现双模式信号输出,提升检测灵敏度。在固相芯片、微球载体表面修饰实验中,该复合物可用于构建夹心式分子检测模型,依靠特异性识别作用捕获靶标分子,完成信号转换与放大。同时可用于分子互作定量分析,对比不同固定化载体表面分子捕获效率,优化固相传感界面的修饰方案。
该复合物属于蛋白基偶联体系,对温度、pH条件较为敏感,高温或者极端酸碱环境会造成蛋白变性,酶催化活性丧失。实验操作全程控制温度,避免剧烈震荡引发蛋白聚集。储存条件需要低温避光,反复冻融会破坏蛋白三级结构,造成复合物失活,因此工作液建议现配现用,减少长时间放置。

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