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Rhodamine Lactoferrin,罗丹明标记乳铁蛋白的光谱稳定性与微流控芯片应用

2026-09-20 分享

Rhodamine-Lactoferrin 也可称 Rhodamine B-Lactoferrin、Tetramethylrhodamine-Lactoferrin,是通过羧基活化法将罗丹明类荧光基团共价连接到乳铁蛋白分子表面得到的功能分子,其550nm激发、575nm发射的橙红色荧光特性,有效避开了生物样本中常见的绿色自发荧光干扰,在微流控芯片的多通道并行检测中表现出优异的信号辨识度。该分子的制备过程采用了低温活化偶联工艺,全程反应温度控制在4摄氏度,避免了罗丹明基团在室温下容易出现的非特异性聚集现象,偶联完成后通过凝胶过滤层析去除游离染料,最终产物的荧光量子产率相较于游离罗丹明仅下降不到12%。

在微流控芯片的液滴分选实验中,该分子可作为标准示踪物加入水相体系,橙红色荧光信号在共聚焦检测模块下可实现单个皮升级液滴的精准识别,液滴内的蛋白浓度分布可通过荧光强度的像素级扫描完成快速重建,检测速度比传统紫外吸收法提升了近20倍。利用该分子构建的微流控筛选平台,还可用于高通量筛选能与乳铁蛋白特异性结合的小分子配体,每小时可完成超过300组样品的平行检测,大幅降低了大规模筛选实验的时间成本。

在胶体纳米颗粒与蛋白相互作用的研究中,该分子的橙红色荧光信号可与其他绿色荧光标记的分子实现双通道同步成像,通过荧光共定位分析,能够清晰观察到纳米颗粒表面蛋白冠的动态组装过程,实时记录乳铁蛋白在纳米颗粒表面的吸附与脱附动力学曲线。该分子在500nm到600nm的激发波段下,光漂白半衰期是普通绿色荧光标记乳铁蛋白的2.3倍,完全满足长时间连续成像实验的信号稳定性要求。

屏幕截图2026-03-19104621.jpg

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