CAS：1351519-86-2，​AT 647N NHS，ATTO 647N琥珀酰亚胺酯

AT 647N NHS（ATTO 647N琥珀酰亚胺酯），属于远红光波段荧光活性酯标记试剂，CAS编号1351519-86-2，荧光母核ATTO 647N激发波长644 nm，发射波长669 nm，处于远红光区域，该波段光穿透能力更强，基质自发荧光干扰弱，大幅降低样本本身背景荧光。分子末端的琥珀酰亚胺酯基团，可在弱碱性缓冲环境下，和底物表面伯氨基快速发生亲核取代反应，形成稳定酰胺键，一步完成荧光共价标记，无需额外活化试剂。

ATTO 647N母核光稳定性优异，耐受高强度激光持续照射，光漂白速率低，非常适合高分辨荧光成像。远红光的光谱特性规避了生物样本内源荧光的主要发射区间，组织、细胞基质产生的自发荧光信号微弱，标记成像信噪比显著提升。该染料分子结构紧凑，偶联至蛋白、多肽等大分子时，对底物空间结构影响有限，标记产物可维持底物原有理化属性。

该试剂储存状态下活性稳定，低温避光条件下可长期保存，水解速率可控，使用时现配工作液，能够有效减少活性酯水解失效带来的标记效率下降。标记反应条件温和，反应温度接近室温，不会造成生物大分子变性失活。反应完成后，仅需要简单透析或者色谱分离，即可去除未反应游离染料，获得纯化荧光偶联物。

该染料适用于构建远红光荧光探针，可用于固相载体表面氨基修饰材料标记，也可用于生物大分子荧光偶联物制备。在多色标记方案中，可搭配488、550波段荧光染料组合，构建三通道荧光检测体系，光谱之间串扰很低。染料荧光量子产率高，同等标记比例下荧光信号更强，可实现低标记密度下的有效信号采集。在荧光共振能量转移体系中，可作为能量受体，和短波长供体染料配对使用，构建FRET传感体系。

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