Horseradish Peroxidase-BIOTIN,生物素化过氧化物酶,RP-Biotin Conjugate
Horseradish Peroxidase-BIOTIN,生物素化过氧化物酶是通过共价偶联反应将生物素分子定点连接到过氧化物酶蛋白表面得到的功能偶联物,完整保留了过氧化物酶的血红素辅基催化中心,同时在蛋白表面引入了可特异性识别亲和素的生物素位点。该产物外观为红色至棕红色均一液体,低温条件下可长期保持稳定,可直接溶于中性缓冲水溶液,在含强变性剂的体系中会快速发生蛋白变性失活。
该偶联物的制备过程通过控制生物素化试剂与酶蛋白的投料摩尔比,可精准调控单个酶分子表面连接的生物素数量,通常将生物素与酶的摩尔比控制在3-8区间,既可以保证后续与亲和素体系的结合能力,又能避免生物素修饰过度覆盖酶的催化活性中心,导致催化活性下降。生物素分子通过柔性连接臂与酶蛋白表面的赖氨酸残基相连,不会干扰血红素辅基的电子传递路径,在过氧化氢存在的条件下,仍可高效催化多种底物发生显色或化学发光反应。
生物素与亲和素之间的超高亲和力相互作用,为该偶联物提供了*强的信号放大潜力,单个结合位点可通过多轮亲和素桥联,在局部富集大量酶分子,大幅提升催化反应的信号输出强度,相较于直接酶标记体系,检测灵敏度可提升数倍至数十倍。该材料可用于构建高灵敏度的催化传感体系,在微流控检测芯片中实现低浓度目标物的可视化信号输出;也可作为信号放大组分,用于表面等离子体共振传感的信号增强模块,提升传感系统的检测下限;还可用于构建有序酶组装阵列,通过亲和素的桥联作用在固体表面制备高密度的酶分子单层,提升连续催化反应的效率与稳定性。

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