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花菁染料Cyanine5.5-刀豆球蛋白A，Cyanine5.5-concanavalinA，Cy5.5-Concanavalin A

2026-09-23 分享

花菁染料Cyanine5.5-刀豆球蛋白A（Cyanine5.5-concanavalinA，Cy5.5-Concanavalin A，Cy5.5标记刀豆球蛋白A糖识别荧光蛋白偶联物）是将Cyanine5.5近红外花菁染料共价偶联至刀豆球蛋白A蛋白表面得到的荧光标记蛋白分子。刀豆球蛋白A是具备糖基识别能力的凝集素蛋白，多肽折叠形成四级球状结构，蛋白表面分布大量赖氨酸残基，侧链伯氨基可以与活化型Cyanine5.5染料发生酰胺偶联反应，在不破坏蛋白糖识别空腔结构的前提下，接入近红外荧光基团。

Cyanine5.5的发射波段落在近红外区域，相比可见光荧光基团，背景荧光干扰更低，信号穿透能力更强。标记反应需要控制染料与蛋白的投料摩尔比例，规避过度标记带来的问题：过量染料修饰会改变蛋白表面电荷分布，扭曲蛋白天然构象，削弱凝集素对糖类底物的识别结合能力。反应全程保持低温避光弱碱性环境，减少蛋白变性与花菁染料光降解。产物经过凝胶过滤色谱分离，除去未反应游离染料，得到均一标记产物，可采用荧光光谱与电泳技术表征标记效率。

该材料的研究方向围绕凝集素-糖相互作用的近红外光谱研究。依托Cy5.5近红外荧光信号，探究刀豆球蛋白A与多糖、含糖大分子底物之间的特异性结合，通过荧光强度变化、荧光偏振技术测定二者之间的结合常数，分析温度、金属离子浓度对识别亲和力的影响。可利用荧光成像手段，观测凝集素在含糖基质表面的吸附分布，分析糖基密度对蛋白吸附富集行为的影响。同时可以开展分子竞争结合实验，引入不同单糖分子，对比各类糖底物与凝集素的竞争结合能力，解析糖分子结构对识别作用的影响规律。还可研究标记蛋白在溶液中的构象稳定性，监测不同环境条件下荧光信号变化，评估蛋白-染料偶联物的储存稳定性，为糖-蛋白分子识别体系提供近红外波段的探针分子。

屏幕截图2026-03-19104621.jpg

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