Cyanine3 hydrazide CY3酰肼 CY3 hydrazide
Cy3-Hydrazide 是一种将 Cy3 荧光染料与肼(hydrazide)官能团结合的化学试剂。Cy3 是一种常用的红色荧光染料,而肼基(–NH–NH2)则是一种反应性官能团,可以与不同的活性分子发生反应,通常用于偶联反应和标记过程。
Cy3-Hydrazide的结构和特性:
Cy3:Cy3 是一种红色荧光染料,具有激发波长约为550 nm,发射波长约为570 nm,广泛用于生物标记和分子检测。
Hydrazide:肼基(–NH–NH2)是一种含氮的官能团,能够与某些化学基团发生亲核反应,特别是与醛基(–CHO)或酮基(–C=O)反应,形成稳定的共价链接。
Cy3-Hydrazide的应用:
与醛基或酮基反应:
Cy3-Hydrazide 最常用于与醛基(如还原糖的醛基)或酮基反应,形成稳定的肼–醛/酮加成物。这种反应广泛应用于蛋白质、核酸和糖类的标记,特别是在生物大分子检测中。
糖标记:
在糖类研究中,Cy3-Hydrazide 可用于标记含有还原性糖(例如还原性葡萄糖或其它糖类)的分子。通过肼基与糖的醛基反应,Cy3 就能作为荧光标签绑定到糖分子上,方便后续的荧光检测。
蛋白质标记:
Cy3-Hydrazide 也可以与具有醛基的蛋白质(例如通过氧化反应暴露出醛基的糖基化蛋白质)进行标记。在蛋白质研究中,这种标记常用于免疫荧光、Western blot 或细胞成像等实验。
核酸标记:
Cy3-Hydrazide 可用于标记带有醛基或酮基的寡核苷酸。它通过与这些基团反应,使得标记的核酸能够在荧光显微镜下进行观察和分析。
生物标记与分子检测:
Cy3-Hydrazide 可以作为一种有效的工具,用于标记各类生物分子(如蛋白质、抗体、核酸等),为分子成像、定量分析、免疫检测等实验提供荧光信号。
反应机制:
Cy3-Hydrazide的主要反应是肼基与醛基(或酮基)通过亲核加成反应形成稳定的肼–醛/酮加成物。具体反应如下:
反应条件:
在适当的pH值下,Cy3-Hydrazide 会与醛基(如还原糖中的醛基)发生反应。通常,pH值在4-7之间较为适宜,温度通常为室温。
反应机制:
Cy3-Hydrazide 的肼基会向醛基或酮基进攻,形成一个亚胺(schiff base)连接物。这种加成物可以通过还原反应(如使用氰基硼氢化物)进一步稳定。
Cy3-Hydrazide的应用实例:
糖的荧光标记:
在糖化学中,Cy3-Hydrazide 常用于标记含有还原性糖的分子。例如,糖链或糖蛋白中的还原性醛基可以与Cy3-Hydrazide发生反应,为糖分子添加荧光标签,便于通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。
蛋白质的糖基化研究:
在研究糖基化蛋白质时,Cy3-Hydrazide可以用于标记带有醛基的糖基化蛋白。通过将 Cy3-Hydrazide 加入实验体系,研究人员可以使用荧光信号定量分析糖基化程度。
核酸和蛋白质互作研究:
在核酸与蛋白质相互作用的研究中,Cy3-Hydrazide 也可以作为荧光标签应用,帮助检测这些分子之间的相互作用,尤其是糖基化的蛋白质和核酸之间的结合。