​Cy3.5 NHS ester Cy3.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯

Cy3.5 NHS Ester 是一种含有 Cy3.5 荧光染料 和 NHS 酯（N-hydroxysuccinimide ester） 基团的化合物。它是一种反应性染料，用于 生物分子的标记，尤其适用于将 Cy3.5 荧光染料 共价连接到含有 氨基（NH2） 基团的分子，如 蛋白质、抗体、DNA 或 RNA。

化学结构与特点

Cy3.5 荧光染料：

Cy3.5 是一种具有 红色荧光 的染料，激发波长通常在 550 nm 附近，发射波长在 570 nm 附近。它提供了强烈、稳定的荧光信号，广泛用于 细胞成像、分子标记 和 免疫检测 等应用中。

NHS 酯（N-hydroxysuccinimide ester）：

NHS 酯基团 是一种 反应性官能团，可以与 氨基（NH2） 基团发生反应，形成 稳定的酰胺键。这种反应在生物标记中非常常见，因为氨基是许多生物分子（如蛋白质、抗体等）的常见官能团。

NHS 酯 反应效率高，能避免产生不稳定的中间体，且反应温和，不会破坏目标分子。

Cy3.5 NHS Ester 可以与带 氨基（NH2） 的生物分子通过 酰胺化反应 形成稳定的共价键，适用于多种生物分子的标记。

强烈的荧光信号：

作为一种 Cy3.5 荧光染料，该化合物能够提供 红色荧光 信号，激发波长通常在 550 nm，发射波长在 570 nm，非常适合在多种荧光显微镜或流式细胞仪中使用。

良好的水溶性：

由于其 NHS 酯 基团和 Cy3.5 荧光染料的结合，Cy3.5 NHS Ester 在水性溶液中具有一定的溶解性，适合在生物标记实验中使用。

应用领域

生物分子标记：

Cy3.5 NHS Ester 可用于标记含 氨基（NH2） 的生物分子，如 蛋白质、抗体、核酸。该化合物与氨基反应生成 稳定的酰胺键，广泛应用于 蛋白质标记、抗体偶联、核酸探针标记 等领域。

免疫检测与荧光成像：

在免疫组化（IHC）、免疫荧光染色（IF）、Western Blot、流式细胞术（FACS）等实验中，Cy3.5 NHS Ester 被用于标记抗体或其他生物分子，以提供清晰、强烈的荧光信号，便于分子检测和分析。

基因表达分析：

通过标记 DNA 或 RNA 探针，Cy3.5 NHS Ester 可应用于 基因杂交（FISH）和 实时PCR 中，帮助研究基因表达、定位及分析。

细胞成像与分子追踪：

该化合物可用于细胞成像实验，标记 细胞表面蛋白 或 细胞内蛋白，帮助研究细胞内外分子的分布、动态变化等。

药物研究与分子探测：

Cy3.5 NHS Ester 可用于标记 小分子药物、化学探针 或 纳米颗粒，用于药物筛选、靶向研究以及分子探测。

实验注意事项

反应条件：

标记反应通常在 弱碱性环境（pH 7.5-9.0）中进行。反应时，NHS 酯 可以通过 酰胺化反应 与 氨基 反应，通常需要 醋酸盐缓冲液 或 碳酸氢盐缓冲液 来调节pH。

常见的偶联试剂如 EDC（1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide）可以促进 NHS 酯 与氨基的反应。

溶解性：

Cy3.5 NHS Ester 可以溶解于常见的水性溶液中，如 PBS 或 Tris缓冲液，以便在这些溶液中进行标记反应。

储存条件：

Cy3.5 NHS Ester 应存放在 -20°C 的避光环境中。应避免高温、湿气及长时间的光照，以防染料的退色或降解。

反应时间：

标记反应时间通常为 1-2小时，反应后可通过透析、凝胶过滤等方法去除未反应的染料，以提高标记纯度。

Cy3.5 NHS Ester 是一种将 Cy3.5 荧光染料 与 NHS 酯 基团结合的化合物，具有 高反应性 和 强烈的荧光信号。它广泛用于 生物分子的标记，尤其是与含 氨基（NH2） 的分子如 蛋白质、抗体、DNA、RNA 发生反应，提供稳定的标记。该化合物适用于 免疫检测、基因分析、细胞成像 和 分子探测 等领域，在生物医学研究和临床检测中具有重要应用。