cy3.5NHS Cy3.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
cy3.5NHS
Cy3.5-NHS 是一种将 Cy3.5 荧光染料 与 NHS(N-hydroxysuccinimide)酯基团连接的化合物,广泛应用于分子标记和生物学研究中,尤其是在蛋白质标记、抗体偶联、核酸探针标记等方面。以下是对其详细的描述和应用信息:
Cy3.5 荧光染料
Cy3.5 是一种红色荧光染料,激发波长通常在 550 nm 左右,发射波长约为 570 nm。它具有较高的荧光强度和良好的稳定性,因此在生物学和医学研究中得到了广泛应用,尤其是在细胞成像、免疫荧光、流式细胞术等实验中。
NHS酯基团
NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester) 是一种常用的活性酯基团,能够与含氨基(NH2)的分子发生反应,生成稳定的共价结合。在Cy3.5-NHS中,NHS酯基团可与蛋白质、抗体或其他带氨基的生物分子反应,形成稳定的染料-分子偶联产物。
Cy3.5-NHS 常用于将Cy3.5荧光染料标记到蛋白质、抗体或其他生物大分子上。通过NHS酯与氨基的反应,染料可以稳定地结合到目标分子上,从而为分子提供荧光信号。这种标记的分子可以在各种检测中使用,例如免疫荧光染色、Western Blot、ELISA等。
核酸标记
Cy3.5-NHS 可以用于标记带有氨基的DNA或RNA探针。通过偶联反应,Cy3.5染料可以与探针分子上的氨基团结合,从而实现基因杂交、RNA定位等实验。
小分子标记
Cy3.5-NHS 还可以标记小分子药物或其他化合物,尤其在药物递送、分子追踪和靶向研究中具有重要应用。
细胞成像与分子追踪
通过标记细胞表面分子、膜蛋白、受体或其他细胞内分子,Cy3.5-NHS 可以帮助研究人员进行细胞成像、分子追踪、动态观测等实验,尤其是在活细胞成像和蛋白质定位中。
反应条件
Cy3.5-NHS的标记反应通常在pH 7.0-8.5的缓冲液中进行。常见的反应试剂如EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide)可以帮助提高偶联效率。
反应时间一般为1至2小时,具体反应时间可以根据实验条件调整,反应温度通常为室温或4°C。
溶解性
Cy3.5-NHS可溶于常见的水溶液和缓冲液中,例如PBS(磷酸盐缓冲液)、Tris缓冲液等,适合大多数生物分子实验。
储存条件
Cy3.5-NHS 应储存在 -20°C 的避光环境中,以保持其稳定性。冻存时,避免反复冻融,以避免染料的降解。
应用领域
蛋白质标记与免疫检测:通过将 Cy3.5-NHS 与抗体或蛋白质偶联,可以用于免疫荧光、流式细胞术、Western Blot 等免疫学实验。
基因研究与核酸标记:可以用于标记 DNA、RNA 探针进行基因表达分析、荧光杂交实验以及RNA定位研究。
药物递送与分子追踪:可以将Cy3.5-NHS标记的小分子药物用于药物递送研究和分子靶向研究,帮助研究药物的分布和靶向效果。
细胞成像与分子追踪:通过标记细胞膜蛋白或其他生物分子,Cy3.5-NHS 使得研究人员能够对细胞内分子的动态进行成像与追踪。
Cy3.5-NHS 是一个功能强大的化学试剂,通过结合Cy3.5荧光染料与NHS酯基团,广泛应用于蛋白质标记、抗体偶联、核酸探针标记等分子生物学和细胞生物学的研究中。它能够提供高灵敏度的荧光信号,广泛应用于免疫检测、基因分析和药物研究等领域,帮助研究人员深入了解生物分子的功能和相互作用。