Cyanine5 carboxylic acid 氰染料5 羧酸
Cyanine5 carboxylic acid 是一种基于 Cy5(Cyanine5)染料的荧光标记试剂,其分子结构中包含一个羧基(-COOH)官能团。羧基的存在使得它可以通过化学反应(如与胺基的酰胺化反应)连接到其他分子或生物体系中,广泛用于荧光标记和探针开发。
产品特点
荧光特性:
激发波长:~646 nm
发射波长:~662 nm
高亮度、低背景信号,适合荧光显微镜、流式细胞术和光谱分析。
活性化修饰:
羧基可以与 EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺)或 NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化后,与含胺基的分子(如蛋白质、抗体、肽或核酸)反应,形成稳定的酰胺键。
水溶性:
Cyanine5 carboxylic acid 在水溶液和有机溶剂中都具有良好的溶解性。
生物相容性:
Cy5 的远红外特性使其适合深层组织成像和背景荧光较低的应用。
应用领域
生物分子标记:
标记蛋白质、肽或寡核苷酸,用于荧光显微成像、分子跟踪或相互作用研究。
探针开发:
开发荧光探针,用于靶向分子、药物递送或疾病标志物检测。
荧光成像:
用于活体成像和深层组织研究。
FRET 实验:
可作为荧光共振能量转移(FRET)的供体或受体分子。
材料科学:
修饰纳米材料或聚合物,用于研究其在生物体系中的行为。
反应与标记方法
直接连接:
通过羧基活化,使用 EDC/NHS 或类似试剂,将 Cyanine5 carboxylic acid 与目标分子上的胺基连接。
步骤示例:
活化羧基:将 Cyanine5 carboxylic acid 溶解在少量无水 DMSO 中,加入等摩尔量的 EDC 和 NHS,反应 15-30 分钟形成 NHS 酯。
与目标分子反应:将活化后的染料加入目标分子溶液(pH 7.5-8.5 的无胺缓冲液,如 PBS),室温孵育 30 分钟至 2 小时。
纯化:通过凝胶过滤(如 Sephadex G-25)、透析或离心超滤去除游离染料。
间接标记:
如果目标分子不直接带有胺基,可以通过化学修饰(如引入胺基或通过交联剂)实现标记。