NTA-PEG-FITC 荧光素聚乙二醇次氮基三乙酸
NTA-PEG-FITC 是一种结合了荧光素标记(FITC)、PEG(聚乙二醇)链和NTA(尼克酰亚胺)的化合物。它常用于生物标记和蛋白质纯化,尤其是在研究分子相互作用时,如与带有组氨酸标签(His-tag)的蛋白质结合。
组成与特性
NTA (Nitrilotriacetic Acid):
NTA 是一种能够与金属离子(如 Ni²⁺)结合的配体。通常,NTA 被用于捕捉带有组氨酸标签的蛋白质(如 His-tag)或其他含有金属离子结合位点的分子。
NTA 与金属离子结合后,能够特异性地与组氨酸标签蛋白结合,常用于亲和纯化技术(如 Ni-NTA 亲和层析)。
PEG (Polyethylene Glycol):
PEG 是一种生物相容性材料,用于增强化合物的溶解性、稳定性和生物相容性。它可以改善 NTA 结合的效率,并减少非特异性结合。
PEG 的使用还可增加分子在体内的半衰期,减少免疫反应。
FITC (Fluorescein Isothiocyanate):
FITC 是一种常用的绿色荧光染料,具有强烈的荧光信号。它的激发波长大约为 488 nm,发射波长为 520 nm。
FITC 使 NTA-PEG 具有荧光特性,便于荧光成像、检测和定量分析。
性质
分子式: 由 NTA、PEG 和 FITC 通过化学偶联形成的复合物。
溶解性: 溶于水、PBS 缓冲液或极性溶剂中。
化学活性: NTA 的配位能力使其能够与金属离子(如 Ni²⁺)形成稳定复合物,并与带 His-tag 的蛋白质或其他靶标分子结合。
应用
His-tag 蛋白纯化:
NTA-PEG-FITC 常用于 His-tag 蛋白的亲和纯化。通过将 Ni²⁺ 负载在 NTA 上,可以特异性地捕捉带有 His-tag 的蛋白质。
FITC 荧光使得标记的蛋白质能够通过荧光显微镜、流式细胞仪等设备进行检测。
分子相互作用研究:
用于研究 His-tag 蛋白与其他分子的结合。例如,NTA-PEG-FITC 可以作为探针,检测与特定 His-tag 蛋白的相互作用。
荧光成像:
在细胞或组织中追踪 His-tag 蛋白的定位和分布,利用 FITC 提供的绿色荧光信号进行实时成像。
细胞捕捉与分析:
用于通过流式细胞仪或荧光显微镜检测带有 His-tag 的细胞或分子,研究其与细胞受体或其他靶标的结合。
药物递送系统:
可以与带有 His-tag 的纳米载体结合,研究其在体内的靶向性和药物递送效率。