一些常见的荧光染料是什么?
荧光染料是能发出荧光的染料,在吸收紫外线或可见光后,能把短波长的光转变为波长较长的可见光波而反射出来,呈闪亮的鲜艳色彩。以下是一些常见的荧光染料:
一、有机荧光染料
荧光素类染料:包括异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)、四氯荧光素(TET)等及其类似物。这是一类具有较多苯环的化合物,应用广泛的是FITC,它能够在488nm处由氩离子激光激发,发射525nm的蓝绿色荧光,并且能够与各种抗体蛋白结合,在碱性溶液中稳定呈现蓝绿色荧光。
罗丹明类染料:包括红色罗丹明(RBITC)、四甲基罗丹明(TAMRA)、罗丹明B(Rhodamine B,TRITC)等。TRITC在550nm处被激发可发射出570nm的黄色荧光。罗丹明类染料具有出色的光稳定性以及许多光物理特性,使其非常适合用作激光染料、荧光探针和颜料。
Cy系列菁染料:菁染料通常有两个杂环体系组成,包括Cy2、Cy3、Cy3B、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7及其类似物。Cy染料的发射波长覆盖了从可见光到近红外光的范围,这使得它们成为多色荧光成像和流式细胞术的理想选择。例如,Cy3耦联基团激发光的*大波长为550nm,*强发射光为570nm;Cy5耦联基团的激发波长650nm,发光波长670nm。
Alexa系列染料:由Molecular Probes开发,其激发光和发射光光谱覆盖大部分可见光和部分红外线光谱区域,应用广泛。Alexa系列染料以高亮度、稳定性、仪器兼容性、多种颜色、pH值不敏感以及水溶性为主要特点。包括AlexaFluor350、405、430、488、532、546、555、568、594、610、633、647、680、700、750等。目前市面上Alexa系列染料应用非常广泛,且逐渐替代传统的荧光染料,如AlexaFluor488可替代FITC、Cy2;AlexaFluor555可替代Cy3、TAMRA;AlexaFluor633可替代APC、Cy5等。
二、生物荧光染料
蛋白类染料:包括藻红蛋白(PE)、藻蓝蛋白(PC)、别藻蓝蛋白(APC)、多甲藻黄素-叶绿素蛋白(PerCP)等。它们大多是在蓝藻中发现的蛋白,具有强的长波长激发和发射荧光,可避免来自其他生物材料荧光的干扰,并且具有高的发射量子产率以及非常高的水溶性,可以与Cy系列菁染料偶联形成复合染料用于抗体标记,如市面上常用的有PE-Cy3/Cy5/Cy7、APC-Cy7、PerCP-Cy5.5等。
核酸荧光染料:对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
综上所述,荧光染料的种类繁多,各具特色,广泛应用于生物学研究、医学诊断、材料科学等领域。在选择荧光染料时,需要根据具体的应用场景和需求进行综合考虑。