DSPE-PEG-DBCO的制备流程及流程图

DSPE-PEG-DBCO 的制备流程及流程图

DSPE-PEG-DBCO（1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[poly(ethylene glycol)-DBCO]）是一种常用于脂质体、纳米粒表面修饰的功能化脂质。它结合了亲脂性的 DSPE（磷脂）和亲水性的聚乙二醇（PEG）链，PEG 末端带有 DBCO（Dibenzocyclooctyne，二苯并环辛炔）基团，可与叠氮（–N₃）通过无铜点击反应（SPAAC）共价偶联，广泛用于生物正交标记、靶向递送和表面功能化。

 一、制备流程简述

DSPE-PEG-DBCO 的制备通常采用两步法：

第一步：DSPE-PEG-NH₂ 的合成或购买

通常DSPE-PEG-NH₂（末端为胺基）分子量为 PEG2000 或 PEG3400，具有良好水溶性。

若从头合成 PEG，可通过环氧乙烷聚合得到 PEG，然后在 PEG 一端接入氨基，得到 DSPE-PEG-NH₂。

第二步：DBCO-NHS 与 DSPE-PEG-NH₂ 的偶联反应

原理：DBCO-NHS 酯与 DSPE-PEG-NH₂ 的氨基反应形成稳定的酰胺键。

反应条件：

溶剂：无水 DMSO、DMF 或氯仿；

反应比例：DBCO-NHS : DSPE-PEG-NH₂ = 1.1~1.2 : 1；

催化剂：通常不需要，或使用微量碱性缓冲液；

温度：室温至 37 ℃；

时间：12~24 小时，避光搅拌。

纯化：

反应完成后，可用透析（MWCO 3k~10k）去除游离的 DBCO-NHS 和副产物；

也可通过凝胶色谱（GPC）或硅胶柱色谱进行分离；

产物可冻干保存。

 二、反应流程图（文字版）

三、注意事项

溶剂要求：需使用无水无酸碱的极性溶剂，避免反应中断；

反应保护：DBCO 对光敏感，反应需在避光条件下进行；

储存：产物建议分装后 -20°C 避光储存，避免重复冻融；

质量检测：通过 ^1H NMR、MALDI-TOF、FTIR 等手段确认结构与纯度。

四、总结

DSPE-PEG-DBCO 的制备主要基于 NHS 酯与胺的偶联反应，操作简便、反应效率高，适合实验室规模及中试制备。该材料因其出色的生物正交反应能力，广泛应用于靶向纳米药物构建、细胞膜修饰、生物传感等领域。