cy5.5荧光染料的激发和发射波长是多少?
cy5.5荧光染料的激发和发射波长是多少?
Cy5.5 是一种常用的 近红外荧光染料(Near-Infrared Fluorescent Dye),属于 Cyanine(菁染料)系列,其波长比Cy5更长,具有更深的组织穿透能力和更低的背景信号,非常适合用于 体内成像(in vivo imaging) 和 远红外荧光标记 等应用。
基本信息
名称:Cy5.5(Cyanine5.5)
激发波长(Excitation):约 675 nm
发射波长(Emission):约 694–710 nm(具体取决于环境)
荧光颜色:近红外(NIR),肉眼不可见,仪器可检测
溶解性:水溶性或有机溶剂溶解性取决于官能团修饰(如 NHS ester、maleimide 等)
结构式:
主要应用
1.体内荧光成像(In Vivo Imaging)
由于其近红外特性,Cy5.5信号能在动物体内穿透深层组织,常用于小鼠成像、肿瘤靶向追踪、药物释放监测等。
2.免疫标记 / 抗体偶联
Cy5.5 可通过 NHS 酯、马来酰亚胺等官能团与蛋白质、抗体、肽偶联,用于荧光标记或靶向检测。
3.荧光探针开发
被广泛用于构建荧光分子探针、FRET体系和纳米探针等。
4.DNA/RNA 探针标记
可与寡核苷酸结合,用于杂交实验、miRNA检测、荧光原位杂交(FISH)等。
5.生物传感器与药物递送系统成像
标记于纳米材料或载体(如脂质体、聚合物、蛋白等)用于追踪、释放动力学研究。
✅ 优点
低背景干扰:在NIR区间荧光干扰小,组织自身荧光弱。
组织穿透能力强:适合活体动物成像。
灵敏度高:发光强度高,适合微量靶标检测。
兼容FRET系统:可用作FRET供体或受体(与Cy7或其他远红外染料搭配)。
注意事项
光敏性强:需避光保存,通常存于 -20°C 干燥环境。
化学稳定性一般:特别是NHS酯类活性基团,易水解,需现配现用。
标记密度控制:蛋白或抗体标记时需控制荧光/蛋白比例,避免荧光淬灭或功能干扰。
常见Cy5.5衍生物(供偶联使用)
衍生物形式 | 功能用途 |
Cy5.5-NHS | 与氨基反应,常用于蛋白/抗体标记 |
Cy5.5-maleimide | 与巯基反应,用于标记含半胱氨酸的分子 |
Cy5.5-azide | Click化学反应用 |
Cy5.5-hydrazide | 与醛/酮基反应,适合糖基或醛标记系统 |
与其他近红外染料比较(如 Cy7、Alexa Fluor 750)
染料 | 激发波长 | 发射波长 | 特点 |
Cy5.5 | ~675 nm | ~694–710 nm | 明亮、穿透力适中 |
Cy7 | ~743 nm | ~767 nm | 更长波长,穿透力更强,但信号略弱 |
AF750 | ~749 nm | ~775 nm | 商用性能强,稳定性好 |
总结
Cy5.5 是一种高灵敏、低背景、适用于近红外区域的荧光染料,特别适用于体内成像和远红外标记。它在抗体标记、探针设计和纳米药物可视化中具有广泛用途。