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cy5.5-Streptavidin,菁染料Cy5.5标记链霉亲和素,化学反应原理

2025-05-07 分享

cy5.5-Streptavidin,菁染料Cy5.5标记链霉亲和素,化学反应原理

cy5.5-Streptavidin 是将近红外菁染料 Cy5.5 与链霉亲和素(Streptavidin)通过化学偶联形成的生物分子探针。链霉亲和素是一种由链霉菌分泌的四聚体蛋白质,每个亚基均含有一个可与生物素特异性结合的位点,其与生物素的结合力极强,这种特异性结合具有高度稳定性和选择性。Cy5.5 作为菁染料家族成员,在近红外光谱区域(约 694 - 710nm)具有强荧光发射,能有效穿透生物组织,减少背景荧光干扰,适用于活体成像和深层组织检测。

其化学反应原理基于 Cy5.5 的羧基(或活化酯)与链霉亲和素氨基的缩合反应。通常先将 Cy5.5 转化为活性酯形式(如 Cy5.5-NHS 酯),在 N - 羟基琥珀酰亚胺(NHS)和 1 - 乙基 - 3 - (3 - 二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)作用下,Cy5.5 的羧基被活化,形成具有高反应活性的 NHS 酯中间体 。链霉亲和素分子表面富含赖氨酸残基,其氨基作为亲核试剂,进攻 Cy5.5 - NHS 酯的羰基碳,发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键,从而实现 Cy5.5 对链霉亲和素的标记。

该标记过程需在温和的缓冲体系(如 pH 7.2 - 7.4 的磷酸盐缓冲液 PBS)中进行,反应温度控制在 4 - 25℃,以避免蛋白质变性。反应结束后,未反应的 Cy5.5 - NHS 酯可通过透析或凝胶过滤色谱法去除,确保标记产物的纯度和活性。标记后的 cy5.5-Streptavidin 可通过生物素 - 链霉亲和素特异性结合系统,与生物素标记的生物分子(如抗体、核酸、蛋白质等)结合,广泛应用于免疫分析、细胞成像、分子生物学研究等领域 。

名称:cy5.5-Streptavidin,菁染料Cy5.5标记链霉亲和素

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

cy5.5-Streptavidin

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