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CY5-APC,1032678-07-1,cy5荧光染料结合别藻蓝蛋白,纯化与表征

2025-05-07 分享

CY5-APC,1032678-07-1,cy5荧光染料结合别藻蓝蛋白,纯化与表征

CY5-APC 是将 Cy5 荧光染料与别藻蓝蛋白(Allophycocyanin,APC)偶联的产物。别藻蓝蛋白是一种从蓝藻中提取的荧光蛋白,具有高荧光量子产率和良好的光稳定性,其吸收峰在 650nm 左右,发射峰在 660 - 670nm;Cy5 作为近红外荧光染料,发射波长在 646 - 662nm,两者结合可实现多色荧光标记和检测。

纯化

CY5-APC 的纯化主要采用凝胶过滤色谱法和离子交换色谱法。凝胶过滤色谱法利用不同分子大小的物质在凝胶柱中保留时间的差异进行分离,将反应混合物上样到葡聚糖凝胶柱(如 Sephadex G - 25 或 Sephacryl S - 200),CY5-APC 因分子量大先被洗脱出来,未反应的小分子染料和游离的 APC 后被洗脱,从而实现分离 。离子交换色谱则基于蛋白质表面电荷差异,选择合适的离子交换树脂(如 DEAE - 纤维素或 CM - 纤维素),通过调整缓冲液的 pH 和离子强度,使 CY5-APC 与杂质分离,进一步提高纯度。

表征

采用多种技术对 CY5-APC 进行表征。紫外 - 可见分光光度法可检测 Cy5 和 APC 的特征吸收峰,确定标记物中两者的比例和纯度;荧光光谱法用于分析 CY5-APC 的荧光发射特性,对比标记前后荧光强度和光谱变化,评估标记效率和荧光稳定性 。通过十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS - PAGE)可分析蛋白质的纯度和分子量分布,判断是否存在降解或聚集现象。质谱(MS)则可测定 CY5-APC 的分子量,验证偶联产物的结构准确性,为其在免疫分析、流式细胞术等领域的应用提供质量保障 。

名称:CY5-APC

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

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