DBCO-PEG-FITC，荧光素-聚乙二醇-二苯基环辛炔的制备方法

DBCO-PEG-FITC，荧光素-聚乙二醇-二苯基环辛炔的制备方法

DBCO-PEG-FITC 是一种多功能共轭分子，由荧光素（FITC）、聚乙二醇（PEG）和二苯基环辛炔（DBCO）通过化学键连接而成。

结构特点：FITC 作为荧光报告基团，在紫外 / 可见光激发下发射绿色荧光（λₑₓ=495 nm，λₑₘ=525 nm），可用于荧光成像或示踪；PEG 链段（常用分子量 2k-20k）提供亲水性和空间位阻，减少非特异性吸附；DBCO 基团是一种高效的生物正交反应模块，能与叠氮（-N₃）基团发生无铜点击化学反应，实现温和条件下的快速偶联。

应用场景：用于生物分子标记（如抗体、多肽）、纳米颗粒表面修饰、生物成像（荧光显微镜、流式细胞术）及药物递送系统的靶向功能化。

制备方法

原料准备

FITC-NHS 酯（荧光素琥珀酰亚胺酯）

DBCO-PEG-NH₂（二苯基环辛炔 - 聚乙二醇 - 氨基，PEG 分子量根据需求选择）

三乙胺（TEA，催化剂）

无水二甲基亚砜（DMSO，溶剂）

合成步骤

步骤 1：FITC 与 PEG 的偶联

将 DBCO-PEG-NH₂（1 eq）溶解于 DMSO 中，加入过量 FITC-NHS 酯（1.5 eq）和 TEA（2 eq），室温避光搅拌反应 4-6 小时。FITC 的 NHS 酯基团与 PEG 末端氨基发生酰化反应，生成 FITC-PEG-DBCO 中间体。

步骤 2：纯化与表征

反应液用透析袋（截留分子量低于 PEG 链段）在去离子水中透析 24 小时，除去未反应的 FITC-NHS 和 TEA 副产物。冻干后得到黄色固体。通过紫外 - 可见光谱（确认 FITC 特征吸收峰）、核磁共振氢谱（¹H NMR，验证 PEG 和 DBCO 结构）及质谱（MALDI-TOF，确认分子量）表征产物。

关键注意事项

FITC 对光敏感，反应需在避光条件下进行。

控制 FITC-NHS 用量避免过度标记，影响 DBCO 基团的反应活性。

透析过程中需频繁换水，确保小分子杂质彻底清除。

名称：DBCO-PEG-FITC，荧光素-聚乙二醇-二苯基环辛炔

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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