CY5.5-Fibrinogen，CY5.5-纤维蛋白原的纯化与表征

CY5.5-Fibrinogen，CY5.5-纤维蛋白原的纯化与表征

CY5.5-Fibrinogen 是由近红外荧光染料CY5.5与纤维蛋白原（Fibrinogen）共价偶联形成的荧光标记蛋白，用于血栓成像、血液动力学研究及生物材料表面功能化。Fibrinogen 是一种血浆糖蛋白，由两组三条多肽链（Aα、Bβ、γ）组成的二聚体（约340 kDa），在凝血级联反应中可被凝血酶（Thrombin）转化为不溶性的纤维蛋白（Fibrin）参与血栓形成。

CY5.5 是一种具有激发/发射波长约为675/695 nm 的花菁染料，适合用于近红外成像，信号穿透组织深、背景干扰低。其NHS酯活性基团可与蛋白质分子表面的胺基（主要为赖氨酸残基）发生酰胺键反应，实现共价标记。

合成CY5.5-Fibrinogen首先需从人血浆或商用来源纯化Fibrinogen。可采用乙醇沉淀法、离子交换层析（如DEAE-Sepharose）和凝胶过滤（如Sephacryl S-300）获得高纯度Fibrinogen，并通过SDS-PAGE验证其完整性。

标记反应一般在pH 8.3的NaHCO₃缓冲液中进行，将CY5.5-NHS溶于DMSO中滴加至蛋白溶液，反应于室温下孵育1~2小时。反应后使用透析、离心过滤或Sephadex G-25层析柱去除游离染料。

表征步骤包括：

UV-Vis 分光光度计：用于测定蛋白和染料的吸光度，计算标记度（Dye-to-Protein Ratio, D/P）。

SDS-PAGE + 荧光扫描：用于观察蛋白条带是否伴随荧光信号，验证共价结合。

动态光散射（DLS）和Zeta电位：分析标记后粒径和电荷是否发生变化，评估其稳定性。

功能测试：检测其与凝血酶或抗体的结合能力是否保留。

产品名称：CY5.5-Fibrinogen，CY5.5-纤维蛋白原

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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