CY5-Sericin,CY5-丝胶蛋白的合成及纯化过程
CY5-Sericin,CY5-丝胶蛋白的合成及纯化过程
CY5-Sericin 是由近红外荧光染料CY5与丝胶蛋白(Sericin)偶联形成的荧光标记生物高分子。Sericin 是一种由桑蚕丝中提取得到的水溶性蛋白质,其分子量分布在10~300 kDa之间,富含丝氨酸、天冬氨酸和苏氨酸等亲水性氨基酸,用于组织工程、水凝胶材料和药物载体的功能改性。
合成步骤包括:
丝胶提取:使用热水煮解法将生蚕丝在90–100°C水中处理30–60分钟,随后离心,取上清并通过透析或醇沉淀法获得纯化丝胶蛋白。
CY5-NHS酯反应:CY5染料以NHS酯形式存在,与丝胶中赖氨酸残基反应。将CY5-NHS溶于DMSO中,并缓慢滴加至丝胶溶液(pH 8.3的NaHCO₃缓冲液)中,避光反应1–2小时。
纯化方法:
超滤:采用10–30 kDa的超滤膜反复离心去除游离CY5;
凝胶层析:使用Sephadex G-50分离小分子染料与蛋白质;
透析法:特别适合大批量样品,使用分子量切断为10 kDa的透析袋。
表征手段:
UV-Vis 光谱:测定280 nm和650 nm的吸收,计算标记度;
荧光光谱:确认荧光激发/发射特性(Ex/Em ≈ 649/670 nm);
DLS 与Zeta电位:检测标记后粒径、电荷变化;
FTIR 与CD谱:分析蛋白二级结构是否因标记改变;
细胞实验:测试生物相容性、摄取效率与功能性保持。
产品名称:CY5-Sericin,CY5-丝胶蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc