FITC-ConA，异硫氰酸酯-刀豆球蛋白A的结构合成

FITC-ConA，异硫氰酸酯-刀豆球蛋白A的结构合成

FITC-Concanavalin A（FITC-ConA）是通过将荧光素异硫氰酸酯（FITC）与刀豆球蛋白A（ConA）共价偶联制备的绿色荧光标记凝集素，用于糖蛋白检测、细胞膜糖链成像和糖类识别研究。ConA 是一种从刀豆（Canavalia ensiformis）提取得到的四聚体糖结合蛋白（约26.5 kDa/单体），对α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基具有高亲和力。

其结构中富含赖氨酸残基，提供了与FITC发生亲核加成反应的位点。FITC的–N=C=S基团可与ConA分子中的伯胺反应，生成稳定的硫脲键。合成过程中主要步骤包括：

缓冲液准备：将ConA溶于0.1 M NaHCO₃缓冲液中，pH 8.5，确保赖氨酸氨基处于去质子状态。

FITC添加：将FITC溶于DMSO中（1 mg/mL），缓慢加入ConA溶液，典型的摩尔比为3:1至6:1。反应在避光条件下进行，室温孵育2小时。

去除游离染料：通过Sephadex G-25凝胶过滤柱或透析方式去除未反应的FITC。

结构表征：

UV-Vis 分析：同时测定280 nm（蛋白）与495 nm（FITC）的吸收，计算Dye/Protein比例；

荧光检测：验证FITC标记是否成功（Ex/Em ≈ 495/519 nm）；

糖结合能力测试：通过葡萄糖-琼脂糖凝胶或甘露糖柱层析测试其识别能力是否受影响；

SDS-PAGE：分析蛋白纯度和是否出现降解。

FITC-ConA 保留了ConA对糖分子的识别能力，并引入了绿色荧光示踪功能，适用于细胞膜糖链结构研究、糖蛋白靶标识别和荧光成像分析，是糖类化学生物学领域的重要工具。

产品名称：FITC-ConA，异硫氰酸酯-刀豆球蛋白A

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc