CY3-Lysozyme，CY3-溶菌酶的合成过程研究

CY3-Lysozyme，CY3-溶菌酶的合成过程研究

CY3-Lysozyme 是由荧光染料CY3与溶菌酶（Lysozyme）共价偶联形成的荧光标记酶，用于酶动力学研究、细胞摄取分析及纳米递送系统的示踪。Lysozyme 是一种约14.3 kDa的小分子蛋白质，存在于体液中，具有裂解细菌细胞壁多糖的能力，结构中含有多个赖氨酸残基，为染料标记提供了良好的化学位点。

合成CY3-Lysozyme的过程主要包括以下几个步骤：

蛋白溶液准备：将溶菌酶（来源可为鸡蛋清或重组形式）溶于pH 8.3的NaHCO₃缓冲液中（0.1 M），该pH有利于赖氨酸氨基质子解离，提高反应效率。

CY3-NHS酯添加：将CY3以NHS酯形式溶于少量DMSO中，缓慢加入蛋白溶液中。染料与蛋白的摩尔比通常设定为3:1至10:1以控制标记密度。

反应控制：在避光条件下，室温反应1-2小时。过量染料可能导致蛋白构象改变，需谨慎控制。

纯化方法：

透析：使用MWCO为3–10 kDa的透析袋去除游离CY3；

层析法：如Sephadex G-25凝胶过滤柱，可实现蛋白与小分子染料的有效分离；

离心超滤也可用于快速浓缩和去除杂质。

表征方法：

UV-Vis 光谱分析，结合280 nm与550 nm吸收值，计算Dye/Protein比例；

荧光光谱：检测染料特征发射峰；

酶活检测：用溶菌酶标准底物（如Micrococcus lysodeikticus 细胞壁悬液）验证其裂解能力是否受标记影响；

SDS-PAGE + 荧光扫描：分析标记蛋白纯度与完整性。

CY3-Lysozyme 兼具酶活性和荧光性能，是研究溶菌酶动力学、细胞摄取机制以及构建可视化纳米载体的重要工具。

产品名称：CY3-Lysozyme，CY3-溶菌酶

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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