Cy3-ASF，CY3标记可溶性细胞外基质蛋白ASF的化学反应原理

Cy3-ASF，CY3标记可溶性细胞外基质蛋白ASF的化学反应原理

Cy3-ASF 是通过将可溶性细胞外基质蛋白 ASF（Asialofetuin，去唾液酸糖蛋白）与花菁类染料 CY3 进行共价修饰所得的荧光复合物，常用于糖类识别、蛋白相互作用研究、表面封闭剂分析及纳米材料修饰等领域。ASF是一种天然糖蛋白，结构上包含多个可糖基化的残基，并富含赖氨酸与半胱氨酸等可反应侧链，是理想的荧光标记底物。

CY3染料通常含有NHS酯、异硫氰酸酯（ITC）或马来酰亚胺等反应性基团，可与ASF蛋白中赖氨酸的ε-氨基或巯基残基通过共价方式结合。在常用的NHS酯标记方法中，CY3-NHS酯在弱碱性条件下（pH 8.3~8.5）与蛋白氨基发生亲核加成反应，形成稳定的酰胺键。整个反应在水相缓冲液（如NaHCO₃缓冲液）中进行，温度可控制在室温至4°C，以保证蛋白不变性。

反应完成后，通过透析或凝胶排阻层析除去未反应的染料，从而获得高纯度的Cy3-ASF产物。标记效率可通过比色法或荧光分光光度法检测，依据280 nm蛋白吸收峰和550 nm染料吸收峰进行定量分析。

从分子结构上看，CY3的共轭π电子体系保证了其在标记后仍能保持强烈荧光发射（λex ≈ 550 nm, λem ≈ 570 nm），并且标记位点距离糖基核心较远，不会干扰ASF的糖识别功能。这种标记策略保留了蛋白的天然构象，同时引入了可视化能力，适合进行高通量筛选、糖链探针验证及纳米结构构建中的空间定位研究。

在应用上，Cy3-ASF 常用于荧光微阵列、糖-蛋白互作研究、聚合物涂层界面分析以及纳米材料表面功能化修饰。由于其兼具生物亲和性与化学稳定性，且染料标记后不影响其糖链结合能力，因此被视为理想的荧光活性生物大分子。该荧光标记反应机制简明可靠，是化学生物研究中常用的功能化手段之一。

产品名称：Cy3-ASF

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc