CY5-MAL,花菁染料CY5-马来酰亚胺的标记反应条件
产品名称:CY5-MAL,花菁染料CY5-马来酰亚胺的标记反应条件
一、化学反应活性
马来酰亚胺的偶联反应
特异性反应:在中性或弱酸性条件下,与含巯基的生物分子(如蛋白质、多肽)发生迈克尔加成反应,形成稳定的硫醚键。
反应条件:通常在PBS或Hepes缓冲液中进行,避免使用含氨基的缓冲液(如Tris),以防止竞争反应。
纯化方法:通过HPLC或凝胶过滤去除未反应染料,提高标记效率。
水溶性改进
磺化修饰:引入磺酸基团(-SO₃H),提高水溶性,减少非特异性结合(如Sulfo-CY5-MAL)。
二、操作注意事项
标记反应条件
缓冲体系:使用不含氨基的缓冲液(如PBS、Hepes),避免与Tris、甘氨酸等竞争反应。
有机共溶剂:DMF或DMSO可提高CY5-MAL溶解性,但需控制浓度(通常<10%)以防止蛋白变性。
避光操作:荧光物质对光敏感,需在暗处或黄光下进行反应。
纯化与储存
纯化方法:通过HPLC或凝胶过滤去除未反应染料。
储存条件:分装后-20℃避光保存,避免反复冻融。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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