CY5-mannose,CY5标记的甘露糖的反应步骤
CY5-mannose,CY5标记的甘露糖的反应步骤
Cy5-Mannose 是通过将单糖甘露糖(Mannose, C6H12O6)与Cyanine5(Cy5)荧光团共价偶联形成的标记化合物。甘露糖分子含有多个羟基,为荧光团偶联提供可修饰位点。Cy5-Mannose 的反应步骤主要涉及活化糖分子或荧光团的羟基,然后通过亲核反应形成稳定共价键,从而实现近红外荧光标记,用于分子示踪、糖-蛋白相互作用研究及药物递送分析。
反应步骤概述:
糖分子保护与活化——甘露糖分子含多个羟基,为保证偶联选择性,通常对部分羟基进行保护(如乙酰化),保留1位或末端羟基为反应位点。荧光团 Cy5 可通过 NHS 酯、碳酸酯或异氰酸酯形式进行活化。
偶联溶液制备——在无水有机溶剂(如DMSO或DMF)或缓冲体系中,将活化的Cy5与甘露糖溶液混合,控制溶液pH(一般为7–9),以保证羟基对酰基的亲核攻击活性,同时避免糖分子降解或异构化。
亲核偶联反应——甘露糖羟基对Cy5-NHS酯的碳酰碳进行亲核攻击,生成酯键或酰胺键,同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺作为离去基。反应温和,通常室温至30℃,时间为数小时到一夜,保证充分偶联。
脱保护步骤(如有)——若糖分子羟基受到保护,需要在偶联后进行脱保护反应(如碱水解乙酰保护基),以恢复甘露糖功能,同时保持Cy5荧光性能稳定。
纯化——通过高效液相色谱(HPLC)、凝胶渗透或薄层色谱(TLC)分离纯化产物,去除未反应糖、过量Cy5及副产物。纯化后产物呈暗红色固体或粉末,便于储存和应用。
表征与验证——使用质谱(MS)确认分子量,核磁共振(NMR)分析糖骨架和连接臂结构,紫外/荧光光谱测定荧光性能及偶联效率。偶联后的 Cy5-Mannose 可用于糖-蛋白相互作用研究、细胞摄取示踪及药物载体标记。
产品名称:CY5-mannose,CY5标记的甘露糖
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc