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Cy5-Hylauronic-acid,CY5标记透明质酸的化学反应原理

2025-08-26 分享

Cy5-Hylauronic-acid,CY5标记透明质酸的化学反应原理

Cy5-透明质酸(Cy5-Hyaluronic acid, Cy5-HA)是一类通过将近红外荧光染料Cyanine5(Cy5)共价偶联至透明质酸(Hyaluronic acid, HA)分子上的化学修饰产物。透明质酸是一种线性多糖,由重复的D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基葡萄糖二糖单元构成,分子上含有大量羧基和羟基,这些官能团为化学修饰提供了丰富的反应位点。Cy5是一种常用的光学探针,吸收峰约650 nm,发射峰约670 nm,具有高荧光亮度和良好的光稳定性。将其修饰到HA骨架上,可以实现透明质酸的可视化追踪,同时为构建功能化生物材料提供新的手段。

化学反应原理主要依赖于羧基活化反应和酰胺键形成。HA主链上的葡萄糖醛酸残基含有羧基,常通过碳二亚胺类缩合剂(如EDC,1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide)与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)共同作用,生成活性酯中间体。随后,Cy5的氨基衍生物(如Cy5-NH2或Cy5-amine)可以与该活性酯发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,实现Cy5对HA的共价标记。这一过程通常在弱酸性至中性缓冲液中进行,以维持羧基活化效率,同时避免多糖链降解。

另一种常见策略是利用Cy5-NHS ester与HA上预先引入的氨基基团反应。由于HA缺乏游离氨基,需先对其进行氨基化修饰,例如在HA的羧基上接枝乙二胺或肼基,赋予氨基功能化。随后,Cy5-NHS ester可与这些氨基直接发生酰胺化反应,从而高效偶联。该路线的优点是反应条件温和、效率较高,同时可控制染料的标记密度。

除了酰胺化途径,点击化学(Click Chemistry)也可用于Cy5-HA的制备。例如,通过在HA上引入叠氮(–N₃)或炔基(–C≡CH)基团,再与修饰有互补炔基或叠氮基的Cy5衍生物发生Cu(I)-催化的叠氮-炔环加成(CuAAC),即可形成稳定的三唑键。这种方法标记效率高、特异性强,尤其适用于需要定点修饰和保持多糖主链完整性的实验体系。

产品名称:Cy5-Hylauronic-acid,CY5标记透明质酸

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

Cy5-Hylauronic-acid

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