CY5-透明质酸钠，CY5标记透明质酸钠的合成步骤

CY5-透明质酸钠，CY5标记透明质酸钠的合成步骤

Cy5-透明质酸钠（Cy5-Sodium Hyaluronate, Cy5-HA-Na）是通过将近红外荧光染料Cyanine5（Cy5）与透明质酸钠（HA-Na）分子进行化学偶联而得到的修饰产物。透明质酸钠是透明质酸的钠盐形式，属于线性多糖，分子链上含有重复的D-葡萄糖醛酸与N-乙酰氨基葡萄糖单元，其羧基以钠盐形式存在，溶于水后表现出高亲水性和良好的生物相容性。Cy5染料具有强烈的红区吸收与发射特征（λ_abs≈650 nm，λ_em≈670 nm），能够作为光学探针赋予透明质酸荧光可视化功能。

合成步骤概述如下：

原料准备：选择分子量合适的透明质酸钠（常在10–200 kDa范围），以确保溶解性和偶联效率；Cy5染料则通常选用其活化形式，如Cy5-NHS ester或Cy5-amine。若使用Cy5-NHS ester，则需在HA-Na分子中引入氨基基团作为反应位点。

前修饰（氨基化处理）：由于透明质酸钠缺乏游离氨基，常利用EDC/NHS活化羧基，再与乙二胺或肼基化合物偶联，使HA链上引入游离氨基。此步骤赋予后续Cy5标记所需的反应位点。产物可通过透析或凝胶过滤纯化。

Cy5标记反应：将氨基化的HA-Na溶解于缓冲液（如pH 7.4 PBS），再与Cy5-NHS ester按一定摩尔比混合。反应通常在避光条件下于室温或低温下进行数小时。Cy5-NHS活化酯与氨基发生酰胺化反应，生成稳定的酰胺键，从而将Cy5牢固连接到HA主链上。

纯化过程：反应结束后，利用透析袋（截留分子量MWCO 10–20 kDa）在去离子水中透析数日，去除未反应的Cy5及副产物。透析液需每日更换并避光处理，以确保完全去除游离染料。纯化产物经冷冻干燥可得Cy5-透明质酸钠粉末。

表征分析：通过紫外-可见光谱确认Cy5的特征吸收峰（约650 nm）；荧光光谱检测发射峰；¹H NMR和FTIR用于验证酰胺键的形成；凝胶渗透色谱（GPC）或SEC-HPLC用于分析分子量及分布；透析液荧光强度检测则可验证游离染料的去除情况。

产品名称：CY5-透明质酸钠，CY5标记透明质酸钠

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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