BHQ-2琥珀酰亚胺酯,916753-62-3的介绍
常用名 BHQ-2 琥珀酰亚胺酯
英文名 Butanoic acid, 4-[[4-[2-[2,5-dimethoxy-4-[2-(4-nitrophenyl)diazenyl]phenyl]diazenyl]phenyl]methylamino]-, 2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester
CAS号 916753-62-3
分子量 603.59
密度 1.37±0.1 g/cm3(Predicted)
沸点 780.6±70.0 °C(Predicted)
分子式 C29H29N7O8

BHQ-2琥珀酰亚胺酯(Black Hole Quencher-2 NHS ester, BHQ-2 NHS)是一种常用的非发光淬灭剂,广泛应用于分子探针、荧光原位杂交、荧光定量PCR(qPCR)以及FRET体系中。BHQ-2能够通过吸收荧光能量而不发射可见光来实现有效淬灭,覆盖的吸收波段约在550–650 nm,与Cy3、Cy5等荧光染料具有良好的匹配性。NHS酯结构使其可与含氨基的蛋白质、寡核苷酸或其他分子共价连接。
化学结构与性质
BHQ-2 NHS ester由两个主要部分组成:
BHQ-2核心结构:BHQ-2属于黑洞淬灭剂系列,其化学结构设计用于高效吸收荧光能量而不发光,从而实现能量转移淬灭(FRET)。BHQ-2具有较宽的吸收光谱,使其能有效淬灭多种绿色至红色荧光团。
NHS活性酯:末端N-羟基琥珀酰亚胺结构可与胺基共价结合,实现BHQ-2在目标分子上的稳定连接。
BHQ-2 NHS ester通常为深红色或暗棕色固体,可溶于DMSO、DMF等极性有机溶剂。在干燥、避光条件下稳定,但易被水解,因此在实验中一般保持在有机溶剂或适宜pH缓冲体系中使用。
应用领域
荧光探针和FRET体系:BHQ-2常作为荧光探针的淬灭剂,与荧光染料形成FRET对,用于检测核酸、蛋白质及酶活性。
实时定量PCR(qPCR):在TaqMan探针中,BHQ-2作为5’荧光染料的淬灭剂,能够在探针切割后释放荧光,实现高灵敏度的定量检测。
蛋白质标记:通过NHS酯可将BHQ-2偶联到蛋白质或多肽,进行荧光能量淬灭实验。
细胞成像与生物传感:结合荧光染料和BHQ-2淬灭剂,可构建活细胞传感器,用于研究生物分子相互作用、酶活性或分子动力学。
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