CY7-Axonal Motor Protein,CY7标记轴丝动力蛋白的化学反应原理
CY7-Axonal Motor Protein,CY7标记轴丝动力蛋白的化学反应原理
CY7-Axonal Motor Protein(CY7标记轴丝动力蛋白)是一种将近红外荧光染料CY7共价标记于轴丝动力蛋白(如驱动神经元轴突运输的分子马达蛋白)上的功能性探针。轴丝动力蛋白是一类ATP依赖性分子马达,沿微管介导囊泡、蛋白复合物及细胞器在轴突内的定向运输。通过CY7标记,可实现轴丝动力蛋白的实时荧光示踪和动力学研究,便于化学和细胞生物学实验。
化学反应原理
CY7标记通常依赖蛋白质表面可反应的氨基或巯基残基,采用以下化学原理进行偶联:
NHS酯偶联:CY7-NHS酯与轴丝动力蛋白赖氨酸残基的氨基反应,形成稳定的酰胺键。反应条件通常为pH 7–8的缓冲液中,温度保持在4–25℃,反应时间为2–4小时。该反应可在保留蛋白功能区域的前提下,实现荧光标记。
巯基偶联:在轴丝动力蛋白中半胱氨酸残基存在自由巯基时,可使用CY7马来酰亚胺或巯基活化衍生物,形成稳定的硫醚键。该反应对蛋白骨架的干扰较小,适合敏感蛋白的标记。
结构与功能兼容性
标记过程中,CY7荧光团通常通过柔性PEG链或短链衔接至蛋白表面,远离ATP结合位点和微管结合区域,保证轴丝动力蛋白的动力学活性不受影响。荧光标记不仅提供可视化,还可通过荧光强度定量蛋白分布及运输效率。
应用
分子示踪:CY7-Axonal Motor Protein可用于体外微管运输实验,追踪蛋白沿微管方向移动的动力学。
化学与药物研究:通过标记分析蛋白对不同小分子或抑制剂的反应,研究其运输动力学变化。
活细胞成像:CY7的近红外荧光特性适合低背景、高灵敏度的细胞成像,观察轴突内运输过程。
结构功能分析:结合标记蛋白与荧光成像,可验证蛋白结构区域的功能关联,探索ATP水解与微管结合机制。
产品名称:CY7-Axonal Motor Protein
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc