CY7-Hemoglobin-Porcine，CY7-Hb，CY7标记猪血红蛋白的纯化过程

CY7-Hemoglobin-Porcine，CY7-Hb，CY7标记猪血红蛋白的纯化过程

CY7-Hemoglobin-Porcine（CY7标记猪血红蛋白）是一种通过共价偶联将近红外荧光染料CY7标记于猪血红蛋白（Hb）分子上的功能性探针。猪血红蛋白作为一种四聚体血红蛋白，由两条α链和两条β链组成，每条链含有一个血红素（heme）基团，能够结合氧分子。在标记过程中，CY7通过活性基团与血红蛋白的赖氨酸残基或巯基残基发生共价反应，使蛋白分子获得可检测的荧光信号，同时保持其的氧结合功能。

纯化过程

CY7标记后的血红蛋白通常通过柱层析或膜分离方法进行纯化。常见步骤包括：

缓冲体系调节：将标记反应混合物转入适宜pH（约7.0–7.5）的缓冲液中，维持蛋白稳定性。

去除未反应的染料：使用透析、凝胶过滤柱（如Sephadex G-25）或超滤方法，去除自由CY7分子，防止背景荧光干扰。

分级纯化：通过阴离子交换或凝胶过滤层析进一步分离标记均一的血红蛋白，保证产品的结构完整性与功能活性。

浓缩与缓冲交换：利用超滤装置将标记蛋白浓缩至所需浓度，并调节至储存缓冲液，通常含有少量甘油或NaCl，以保持蛋白稳定。

表征方法

光谱分析：利用紫外-可见光吸收光谱确认血红蛋白的血红素吸收峰，同时测量CY7标记的近红外吸收峰（约750 nm），通过比值可估算标记效率。

荧光测定：激发CY7荧光特性（约750 nm激发，约770–780 nm发射）验证标记成功及荧光强度。

SDS-PAGE分析：通过变性凝胶电泳观察蛋白分子量及标记均一性，结合荧光成像确认CY7标记位置。

功能验证：测定标记后的血红蛋白氧解离曲线和结合能力，确认其保留氧结合活性。

稳定性评估：在不同pH、温度及光照条件下检测荧光和蛋白稳定性，保证长期实验适用性。

CY7-Hemoglobin-Porcine兼具血红蛋白生物活性和CY7近红外荧光特性，可用于体内外血红蛋白示踪、氧转运研究及纳米材料功能化实验，为生物化学和化学研究提供可靠的工具。

产品名称：CY7-Hemoglobin-Porcine

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

推荐产品：

FITC-17β-雌二醇

CY5-Salidroside

CY5-Salidroside红景天苷衍生物

FITC-dopamine

CY3-DA

FITC-3-O-乙基抗坏血酸醚

Maleimido-mono-amide-DTPA

CY5-Amphotericin B

仅用于科研，不能用于人体。小编axc