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RhodamineB-PEG-α-Chymotrypsin,RB-聚乙二醇-α-糜蛋白酶的化学结构特点

2025-09-12 分享

RhodamineB-PEG-α-Chymotrypsin,RB-聚乙二醇-α-糜蛋白酶的化学结构特点

RB-PEG-α-Chymotrypsin 是通过化学偶联将 α-糜蛋白酶(α-Chymotrypsin, α-CT)与聚乙二醇(PEG)修饰并进一步与罗丹明 B(Rhodamine B, RB)结合形成的荧光标记酶复合物。α-糜蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,能够特异性水解芳香族氨基酸残基的肽键;PEG 修饰提高了其水溶性和生物稳定性,而 RB 标记则提供荧光信号。RB-PEG-α-Chymotrypsin 的设计目标是实现酶的可视化,同时保持酶活性与溶液稳定性。

化学结构特点:

蛋白结构:α-糜蛋白酶分子量约 25 kDa,含有赖氨酸氨基、天冬氨酸和谷氨酸侧链等官能团,提供偶联位点。酶的活性中心由丝氨酸、组氨酸和天冬氨酸三联体组成,保持催化活性对结构完整性要求高。

PEG 修饰:通过 α-糜蛋白酶表面赖氨酸氨基与 PEG-NHS 偶联,形成稳定酰胺键,增加蛋白水溶性,降低免疫原性,延长循环半衰期,同时减少酶在反应体系中的非特异性吸附。PEG 链长度通常在 2–5 kDa 范围内,兼顾溶解性与空间阻隔效果。

荧光标记:PEG 链末端通过 RB-NHS 偶联罗丹明 B,形成 RB-PEG-α-Chymotrypsin。RB 提供荧光信号,激发峰约 540–555 nm,发射峰约 565–580 nm,使酶复合物可在细胞或体外实验中进行可视化追踪。

偶联特点:偶联条件温和(pH 7.2–8.5),避免破坏酶活性中心和二级结构。偶联比例可控,以保证荧光强度同时保留催化活性。

结构稳定性:RB-PEG-α-Chymotrypsin 在水溶液和缓冲液中稳定,荧光信号持久,PEG 修饰有效降低酶分子聚集和降解,增强长期储存性能。

应用优势:

酶动力学研究:通过荧光信号实时监控酶活性及底物水解过程。

药物递送与载体研究:评估酶在纳米载体或聚合物体系中的分布与稳定性。

活体成像与示踪:可用于体外或活体实验,观察酶在细胞或组织中的摄取和定位。

蛋白工程实验:用于研究酶修饰、荧光偶联对催化功能和结构稳定性的影响。

产品名称:RhodamineB-PEG-α-Chymotrypsin,RB-聚乙二醇-α-糜蛋白酶

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

RhodamineB-PEG-α-Chymotrypsin

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc