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CY3-R8,花菁染料CY3标记R8的反应机理

2025-09-16 分享

CY3-R8,花菁染料CY3标记R8的反应机理

CY3-R8是一种将花菁染料CY3共价标记于含有八个精氨酸残基的寡肽(R8, octa-arginine)上的荧光衍生物。R8作为典型的细胞穿膜肽(CPP),因其高阳离子性而能够有效介导分子跨膜转运,结合Cy3荧光标记后,可在细胞内追踪分子动力学及递送行为。CY3的标记通常通过其活性NHS酯或异氰酸酯与肽链上的氨基基团反应形成稳定共价键。

反应机理核心是亲核取代反应(nucleophilic substitution)。R8肽链中每个精氨酸残基的N端氨基或赖氨酸残基侧链氨基作为亲核试剂,攻击CY3-NHS酯上的羰基碳原子。该过程形成了中间的四面体过渡态,并随NHS离去,终生成稳定的酰胺键。反应路径可以简述为:1)氨基的孤对电子攻击羰基碳形成负电荷中间体;2)羰基氧重新恢复双键,同时NHS基团作为良好离去基团脱离;3)生成稳定的Cy3–肽酰胺共价连接。

该反应通常在温和条件下进行,以保护肽结构和Cy3荧光性质。pH一般控制在7–9,确保氨基保持未质子化状态,提高亲核性,同时避免高pH引起肽降解或染料水解。反应温度通常为室温或略低,以保持肽链构象和Cy3染料的光学稳定性。溶剂选择上,常用干燥有机溶剂(如DMSO、DMF)或缓冲体系(如PBS)进行稀释反应,以保证反应均一和亲核取代效率。

反应完成后,通常通过透析、凝胶过滤或反相高效液相色谱(HPLC)去除未反应的Cy3-NHS及副产物,获得高纯度CY3-R8产物。产物保留R8的阳离子性质和穿膜能力,同时提供强荧光信号,用于细胞摄取、纳米载体修饰以及体内外成像实验。

CY3-R8反应机理的特点在于:1)选择性高,主要针对一级氨基反应,不影响肽主链其他功能;2)生成酰胺键稳定,水溶性良好;3)条件温和,保证荧光染料和肽的结构完整性;4)反应效率高,易于调控标记度。通过调节摩尔比和反应时间,可实现单标或多标R8肽,满足不同实验设计需求。

总之,CY3-R8结合了R8肽的细胞穿膜特性与Cy3的荧光可视化能力,其反应机理以NHS酯的亲核取代为核心,通过温和条件实现高效、稳定的共价标记,为药物递送、分子追踪及生物成像研究提供可靠工具。

产品名称:CY3-R8,花菁染料CY3标记R8

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

CY3-R8

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc