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FITC-CRGD,异硫氰酸荧光素标记多肽cRGD的化学反应原理

2025-09-29 分享

FITC-CRGD,异硫氰酸荧光素标记多肽cRGD的化学反应原理

异硫氰酸荧光素标记环状RGD多肽(FITC-cRGD)是一种将环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(cRGD)序列通过共价方式与荧光染料FITC连接形成的功能化分子。cRGD多肽以其环状结构和特异性识别整合素受体(如αvβ3、αvβ5)而闻名,是靶向肿瘤血管和细胞外基质的重要分子。通过FITC标记,可将cRGD多肽的靶向能力与可视化特性相结合,用于细胞成像、受体追踪和药物递送系统研究。

FITC-cRGD的化学反应原理基于FITC的异硫氰酸(–N=C=S)活性基团与cRGD多肽中的游离氨基(通常为N端氨基或赖氨酸残基上的ε-氨基)发生亲核加成反应。该反应属于典型的异硫氰酸-氨基反应,生成稳定的硫脲键(–NH–C(=S)–NH–),其共价连接特性确保荧光分子在生物体系中不易脱落。

在具体操作中,cRGD多肽通常溶解于弱碱性缓冲液(如碳酸氢盐缓冲液,pH 8.0–9.0),以使氨基处于去质子化状态,从而提高亲核活性。FITC溶于适当的有机溶剂(如DMSO)后逐滴加入多肽溶液,反应在室温下搅拌数小时完成。温和的反应条件能够避免环状多肽结构的开环或氨基保护基团的水解,同时保证荧光素的光化学稳定性。

该化学反应的特点在于选择性高、条件温和且生成物稳定。通过调节pH和溶剂体系,可以控制FITC标记的位点与程度,避免多标记导致多肽活性受损。反应完成后,产物可直接进行纯化,常用方法包括透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC),以去除未反应的FITC分子和副产物。

在应用中,FITC-cRGD保留了环状RGD的整合素识别能力,可用于体外细胞内靶向实验以及体内成像研究。荧光信号的稳定性使其在共聚焦显微镜、流式细胞术或体内小动物成像中能够提供高灵敏度的数据,从而实现多肽靶向性与可视化的结合。

产品名称:FITC-CRGD,异硫氰酸荧光素标记多肽cRGD

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

FITC-CRGD,

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc