FITC-E7，异硫氰酸荧光素标记多肽E7的合成方法

FITC-E7，异硫氰酸荧光素标记多肽E7的合成方法

异硫氰酸荧光素标记多肽E7（FITC-E7）是一种将HPV E7蛋白衍生短肽通过共价方式与FITC连接形成的功能化分子。E7多肽在肿瘤免疫学和学研究中具有重要应用，其短肽序列含有可用于MHC结合的氨基酸残基。FITC标记后，E7多肽既保留其生物学活性，又具有可通过荧光信号检测和追踪的特性，可用于细胞摄取、免疫原性研究及体外定位实验。

FITC-E7的类似于其他氨基标记多肽，利用FITC的异硫氰酸基团与E7多肽上的游离氨基发生亲核加成，生成稳定的硫脲键。在反应完成后，为获得高纯度和均一性的产物，需对反应混合物进行严格纯化。常用的纯化方法包括：

透析：利用分子量截断膜（MWCO适合多肽大小），去除未反应的FITC和小分子杂质。

高效液相色谱（HPLC）：反相HPLC可根据多肽疏水性差异分离标记与未标记的多肽，确保产物纯度达到≥95%。可结合紫外吸收检测（FITC在495 nm）确认荧光标记情况。

凝胶过滤色谱：可去除分子量明显不同的副产物，并缓冲换液，得到适合生物实验的溶液。

产物的表征通常包括以下几方面：

质谱分析（MS）：确认分子量与理论值一致，从而验证FITC标记是否成功。

紫外-可见光光谱：检测FITC的特征吸收峰（约495 nm），评估标记效率。

荧光光谱：检测FITC标记后的荧光发射峰（约520 nm），验证荧光功能是否保留。

HPLC分析：进一步确认纯度和单一性，确保无未反应FITC干扰实验。

纯化后的FITC-E7多肽在水溶液及生理缓冲液中稳定，能够在体外细胞实验中维持多肽的靶向活性，并显示稳定荧光信号。该产物适用于共聚焦显微镜成像、流式细胞术分析及免疫检测，可用于探索多肽与细胞受体的相互作用、细胞内运输和亚细胞定位。

产品名称：FITC-E7，异硫氰酸荧光素标记多肽E7

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

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