HRP WGA标记蛋白质的实验操作要点

产品名称：HRP WGA标记蛋白质的实验操作要点

技术优势与局限

优势：

高灵敏度：酶催化信号放大显著提升检测下限，适合低丰度靶标。

特异性：WGA对糖基化结构的精准识别减少非特异性结合。

多模态兼容：兼容荧光、化学发光及电镜等多种检测平台。

稳定性：偶联复合物耐受酸碱、变性剂及温度变化，确保实验重复性。

局限：

背景干扰：高浓度底物或非特异性结合可能导致背景噪声。

操作复杂度：需优化反应条件（如pH、温度、时间）以平衡灵敏度与特异性。

代谢依赖性：部分应用（如糖基化标记）需细胞代谢掺入特定糖基。

实验操作要点

标记方法：

戊二醛法：通过双功能交联剂连接HRP与WGA的氨基，形成稳定复合物。

过碘酸钠氧化法：氧化HRP糖基生成醛基，与抗体/蛋白质氨基形成希夫碱，经硼氢化钠还原稳定结构。

生物素-链霉亲和素系统：间接标记增强信号，如生物素化WGA与链霉亲和素-HRP联用。

实验步骤：

样品制备：细胞裂解、蛋白定量、SDS-PAGE电泳分离。

转膜与封闭：PVDF/NC膜转印后，用脱脂牛奶/BSA封闭非特异性位点。

抗体孵育：一抗结合靶蛋白，HRP WGA作为二抗进行信号放大。

显色与检测：ECL化学发光或TMB/DAB显色，结合成像系统分析。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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