CF568链霉亲和素偶联物的光学性能与生物偶联机制
产品名称:CF568链霉亲和素偶联物的光学性能与生物偶联机制
1. 结构特性与组成
CF568荧光染料:
光谱特性:CF568属于氧杂蒽类荧光染料(如Alexa Fluor 568类似物),激发峰约560-565 nm,发射峰约570-585 nm,位于橙红色可见光波段,兼容标准荧光显微镜的TRITC/Cy3滤光片,适用于多色荧光实验。
光稳定性:具有较高的抗光漂白能力,适合长时间成像或动态追踪。
化学修饰:通常通过NHS酯、马来酰亚胺或点击化学基团(如炔基、叠氮)与链霉亲和素偶联,确保染料活性与蛋白功能不受影响。
链霉亲和素(Streptavidin):
生物特性:源自链霉菌的四聚体蛋白,对生物素(维生素H)具有超高的亲和力(解离常数Kd≈10⁻¹⁴ M),且耐酸、耐热、耐酶解,是生物素-亲和素系统(BAS)的核心组件。
偶联位点:链霉亲和素的赖氨酸残基或半胱氨酸残基可与CF568的活性基团反应,形成稳定的共价键,同时保留生物素结合口袋的完整性。
2. 光学性能与生物偶联机制
荧光特性:CF568的高量子产率(通常0.6-0.9)与低背景噪声特性,使其在细胞成像、流式细胞术及微孔板检测中表现出色。
生物素-亲和素相互作用:链霉亲和素与生物素化分子(如抗体、核酸探针、脂质体)结合后,通过CF568的荧光信号实现高灵敏度检测,信号放大效应可达10³-10⁶倍。
偶联稳定性:化学交联剂(如BS³、SMCC)或无溶剂点击化学确保偶联物在生理条件下稳定,避免染料脱落或蛋白变性。
3. 核心应用场景
免疫荧光与显微成像:
细胞标记:生物素化抗体与CF568-链霉亲和素偶联物结合,用于细胞表面抗原、胞内蛋白(如细胞骨架、信号分子)的定位与动态追踪。
组织切片:在冰冻或石蜡切片中标记生物素化探针,结合共聚焦显微镜或超分辨显微镜(如STED、SIM)实现亚细胞结构解析。
流式细胞术与细胞分选:
多色流式实验中,CF568-链霉亲和素可与生物素化抗体联用,检测细胞表面或胞内标志物,适用于免疫分型、细胞周期分析或凋亡检测。
分子互作研究:
蛋白质-蛋白质相互作用:通过生物素化诱饵蛋白捕获靶蛋白,结合CF568荧光信号进行定量分析(如ELISA、Western blot)。
核酸杂交:生物素化寡核苷酸探针与CF568-链霉亲和素偶联物结合,用于荧光原位杂交(FISH)或实时PCR产物检测。
药物开发与递送:
靶向载体:生物素化纳米颗粒(如脂质体、聚合物胶束)通过链霉亲和素桥接CF568,实现肿瘤靶向成像或药物递送监测。
高通量筛选:在药物筛选平台中,CF568-链霉亲和素用于检测生物素化靶标与化合物库的相互作用。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
关于我们:
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