Alexa Fluor 488 Con A的核心特性与原理
产品名称：Alexa Fluor 488 Con A的核心特性与原理
核心特性与原理
荧光染料特性：Alexa Fluor 488为绿色荧光染料，激发波长495-499 nm，发射波长519-520 nm，亮度高、光稳定性强，pH 4-10范围内稳定，适合长时间成像及复杂实验环境。
Con A（刀豆球蛋白A）功能：凝集素，特异性结合α-甘露糖（α-man）和α-葡萄糖（α-glc）残基，常用于标记细胞表面糖蛋白、内质网（ER）和高尔基体（Golgi），在细胞生物学中用于研究糖蛋白分布、细胞器功能及细胞间相互作用。
应用领域
细胞成像与标记：
免疫荧光（IF）：标记细胞表面糖蛋白，如肿瘤细胞、免疫细胞等，结合荧光显微镜观察细胞形态及糖蛋白分布。
流式细胞术（FC）：定量分析细胞表面糖蛋白表达水平，用于细胞分选、免疫表型分析。
组织切片染色：在免疫组化（IHC）中标记组织中的糖蛋白，辅助病理诊断。
细胞器研究：
Con A可特异性结合内质网和高尔基体中的糖蛋白，用于研究细胞器动态变化、蛋白质运输路径。
多色成像与共定位分析：
与DAPI（核染色）、TRITC（红色荧光）等联用，实现三色/多色成像，分析细胞内不同组分的共定位关系。
实验操作要点
标记方法：
通过NHS酯与Con A的氨基反应共价偶联，形成稳定酰胺键。需避免含氨基的缓冲液（如Tris、甘氨酸），推荐使用碳酸氢钠缓冲液（pH 8.3-9.0）。
标记比例需优化（通常染料:蛋白=1:1至10:1），通过吸光度比值（A494/A280）计算标记效率。
储存与处理：
储存液：2 mg/ml溶于无菌水，分装后-20℃避光保存，避免反复冻融（稳定期≥1个月）。
实验操作：全程避光，使用无氨基缓冲液，避免染料水解失效。
成像条件：
激光器：488 nm，发射滤光片520 nm（FITC通道），配合抗淬灭封片剂（如ProLong Gold）减少信号衰减。
优势与对比
优势：
高灵敏度与低背景：亮度高于FITC/Cy2，光稳定性强，信噪比高，适合弱信号检测。
pH耐受性：宽pH范围稳定性，适配酸性/碱性实验环境。
多色兼容性：与近红外/远红外染料联用，实现多参数同步检测。
对比：
与FITC对比：亮度更高、光稳定性更强、pH稳定性更优。
与Alexa Fluor 488抗体偶联物对比：Con A特异性结合糖蛋白，适用于糖生物学研究；抗体偶联物则针对特定抗原。
温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh
关于我们：
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