FITC-Phalloidin:细胞骨架荧光标记的经典工具
产品名称:FITC-Phalloidin:细胞骨架荧光标记的经典工具
1. 荧光性能与光学优势
光谱参数:绿色荧光(Ex/Em=495-496/513-516 nm),与DAPI(蓝)、Texas Red(红)等染料光谱兼容,适合多色荧光成像。
光学特性:量子产率高(约0.9),光稳定性良好,pH耐受范围广(4-10),适合长时间显微成像及流式细胞术。
仪器适配:兼容荧光显微镜(如共聚焦)、流式细胞仪及紫外/蓝光激发系统。
2. 应用场景与实验价值
细胞骨架研究:标记细胞内微丝网络,研究细胞形态、迁移、分裂及伪足形成(如癌细胞侵袭、神经元突触)。
组织学与病理学:用于固定组织切片(如肿瘤、神经组织)、细胞培养物及微生物(酵母、真菌)的F-actin可视化。
动态过程追踪:结合活细胞成像技术,观察微丝动态变化(如应力纤维形成、细胞极性建立)。
多色联用:常与DAPI(核染色)、Alexa Fluor系列染料联用,实现亚细胞结构共定位分析。
3. 合成与标记操作流程
储存与稀释:储存液(-20℃避光保存,避免反复冻融),工作液现配现用(如5 μL储存液+200 μL PBS),可添加1% BSA减少非特异性背景。
细胞处理:
固定:4%甲醛(室温10-15 min,避免甲醇以防破坏肌动蛋白)。
透化:0.5% Triton X-100或丙酮(≤-20℃)处理5-10 min,增强染料渗透。
染色:孵育FITC-Phalloidin工作液(20-30 min,避光),洗涤后封片(如Fluoromount-G)。
成像:荧光显微镜或共聚焦显微镜观察,选择FITC滤片(Ex/Em=495/516 nm)。
4. 使用注意事项与安全规范
储存条件:-20℃以下避光保存,分装小体积以减少冻融次数;储存液有效期通常1年,工作液现配现用。
安全防护:Phalloidin具毒性(LD₅₀=2 mg/kg),操作时需戴手套、护目镜及实验服,避免吸入或皮肤接触;废弃物按生物危害处理。
实验优化:
避免使用含甲醇的固定剂,以防肌动蛋白解聚。
固定后充分洗涤,减少非特异性结合。
封片剂需兼容荧光保存(如抗淬灭封片剂),延长标本保存时间(4℃避光可存6个月)。
质量控制:纯度≥95%,需通过荧光光谱校准及对照实验验证标记特异性。

关于我们:
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