AF546 tyramide的性能优势

产品名称：AF546 tyramide的性能优势

1. 结构与化学特性

分子结构：化学式为C₆₀H₈₃Cl₃N₆O₁₂S₃，分子量约1282.88，由Alexa Fluor 546荧光染料与酪胺通过共价键结合而成，属于酪胺信号放大（TSA）系统的核心试剂。

光学特性：激发波长561 nm，发射波长572 nm，发出橙红色荧光，具有高亮度、良好光稳定性及低背景干扰特点。

反应机制：在辣根过氧化物酶（HRP）催化下，酪胺转化为高活性自由基，与靶点附近蛋白质的酪氨酸残基共价结合，形成局部荧光信号“热点”，实现信号原位放大50-100倍。

2. 合成与反应条件

合成路径：通过化学键将Alexa Fluor 546与酪胺偶联，形成共轭物。反应需在弱碱性条件（pH 8.0-9.0）下进行，涉及酶促活化步骤。

活化与偶联：HRP在低浓度过氧化氢（H₂O₂）存在下催化酪胺生成自由基，后者与靶点附近的酪氨酸残基共价结合，形成稳定信号。

3. 应用场景

免疫组织化学（IHC）：用于石蜡包埋（FFPE）切片、细胞或组织样本的超灵敏抗原检测，尤其适用于低丰度蛋白（如肿瘤标志物、神经突触蛋白）的标记。

多色荧光成像：与AF488、AF594等荧光染料联用，实现多靶点同步成像及空间分布分析。

原位杂交与转录组学：支持RNAscope、空间转录组研究及原位RNA检测，提升信号分辨率。

流式细胞术与细胞成像：用于细胞表面/内部分子的低表达受体或细胞因子检测，以及信号通路中分子相互作用的共定位分析。

4. 性能优势

高灵敏度：可检测传统方法难以识别的低丰度抗原，减少非特异性背景信号。

稳定性强：共价结合方式使信号耐受多次洗涤，减少背景噪声，适合多重染色步骤。

多色兼容性：与AF488、AF647等染料兼容，支持多通道荧光实验。

空间分辨率：通过信号“热点”实现高空间分辨率检测，适用于纳米级定位研究。

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