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iFluor 790琥珀酰亚胺酯的核心应用场景

2025-11-10 分享

产品名称:iFluor 790琥珀酰亚胺酯的核心应用场景

1. 结构与化学特性

核心结构:基于琥珀酰亚胺酯(NHS酯)活性基团,可与含伯胺(-NH₂)的生物分子(如蛋白质、抗体、核酸)发生共价反应,形成稳定酰胺键。分子量约1768.30,高水溶性,避免有机溶剂使用。

化学稳定性:pH耐受范围广(4-10),光稳定性良好,抗光漂白能力强,适合复杂生物环境。储存需-20℃避光干燥,避免反复冻融;配制母液时建议浓度1-10mM,分装单次使用。

2. 光学特性

光谱参数:激发波长787-790 nm,发射波长812-817 nm,属于近红外光谱区,穿透力强,生物自发荧光背景低,信噪比高。

性能优势:荧光亮度强(优于Alexa Fluor等竞品),与吲哚菁绿(ICG)、IRDye 800光谱相似但可分离远红色荧光团,支持多色分析;光稳定性良好,适合长时间成像。

3. 核心应用场景

生物标记:标记蛋白质、抗体、核酸(如DNA/RNA探针),用于免疫荧光、流式细胞术、Western blot、FISH技术及实时荧光定量PCR。

活体成像:小动物活体成像(如SAIVI系统),利用近红外光穿透组织能力追踪体内目标,适用于肿瘤、药物分布等研究。

多模式检测:双色Western印迹、多色流式细胞术及荧光共定位研究,支持多靶点同时观察。

探针开发:构建荧光探针、生物传感器,检测分子相互作用或浓度变化;作为合成中间体制备功能化染料(如光敏剂、淬灭基团)。

4. 实验操作要点

反应条件:偶联反应需在碳酸盐缓冲液(pH 8.0-9.0)中进行,避免含游离胺(如Tris、甘氨酸)或硫醇的缓冲液干扰;目标蛋白浓度需≥2 mg/mL(低浓度降低效率),推荐浓度2-10 mg/mL。

纯化与检测:使用Sephadex G-25柱或旋转离心柱纯化,通过分光光度计(如NanoDrop)检测浓度及标记效率(DOL计算);需验证探针纯度及信号稳定性。

标记比例优化:推荐染料/蛋白摩尔比10:1(如IgG标记),可通过调整比例(5:1至20:1)优化标记效果,避免过度标记影响生物活性。

iFluor 790琥珀酰亚胺酯

关于我们:

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