iFluor 860 琥珀酰亚胺酯的结构特性与化学本质
产品名称:iFluor 860 琥珀酰亚胺酯的结构特性与化学本质
1. 结构特性与化学本质
荧光核心:近红外染料iFluor 860,激发波长853 nm,发射波长878 nm,属于NIR-II(近红外二区)光谱,组织穿透深度达1-2 cm,背景干扰极低。
反应基团:琥珀酰亚胺酯(NHS ester)可与蛋白质、抗体、肽链或含氨基(-NH₂)的生物分子发生共价反应,形成稳定酰胺键,实现特异性标记。
物理性质:分子量1571.90,纯度≥95%,水溶性良好(减少有机溶剂使用),pH耐受范围广(4-10),光稳定性高(抗光漂白),分子式含磺酸基团增强水溶性。
2. 荧光性能与光学优势
近红外特性:发射波长878 nm位于生物组织“透明窗口”,减少自发荧光干扰,提升成像信噪比;与Cy5、Cy7等远红染料光谱重叠小,支持多色荧光共定位分析。
光稳定性:量子产率高(>0.9),荧光信号持久,适合长时间动态成像;光漂白速率低,耐受多次激发。
生物相容性:水溶性设计降低对生物分子活性的影响,pH不敏感特性适应生理环境,兼容活细胞/活体实验。
3. 应用场景与实验价值
蛋白质与抗体标记:用于免疫荧光、流式细胞术、Western Blot等,标记抗体或酶以检测特定抗原/蛋白分布。
细胞与活体成像:
活细胞成像:标记细胞膜蛋白、胞内抗原或纳米载体,观察细胞动态过程(如迁移、增殖)。
小动物活体成像:肿瘤示踪、血管研究、淋巴系统追踪及药物递送监测,穿透深层组织实现精准定位。
多模态成像:与PET/CT、MRI或光声成像联用,实现分子-功能-结构多维度分析。
纳米材料与药物开发:标记脂质体、聚合物纳米颗粒或抗体药物偶联物(ADC),追踪体内分布与释放动力学。
基础生物学研究:细胞信号通路分析、蛋白质相互作用研究及疾病机制探索(如肿瘤微环境、神经退行性疾病)。
4. 合成与标记操作流程
储备液配制:无水DMSO溶解染料(1-10 mM),分装后-20℃避光保存,避免反复冻融。
标记反应:
pH调节:蛋白质溶液与1 M碳酸氢钠混合,调整pH至8.5-9.5(弱碱性环境促进反应)。
比例优化:推荐染料/蛋白质质量比10:1,可通过5:1、15:1、20:1梯度实验确定最佳比例(避免过度标记影响生物活性)。
反应条件:室温或37℃孵育30-60分钟,避免使用含游离氨基的缓冲液(如Tris、甘氨酸)。
纯化与储存:
凝胶过滤(如Sephadex G-25)分离标记产物,收集目标组分。
短期储存:4℃避光保存;长期储存:浓缩或冷冻干燥,-20℃以下避光保存。

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