Fitc-PSMA,FITC标记前列腺特异性膜抗原探针的结构与化学特性
产品名称:Fitc-PSMA,FITC标记前列腺特异性膜抗原探针的结构与化学特性
1. 结构与化学特性
核心组成:由FITC(异硫氰酸荧光素)与PSMA(前列腺特异性膜抗原)配体共价偶联形成。FITC通过异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与PSMA配体的氨基反应,形成稳定硫脲键;连接臂(如氨基己酸Ahx)可减少空间位阻,提升结合效率。PSMA配体多为小分子抑制剂(如基于尿素结构的谷氨酸-尿素类似物),特异性识别PSMA活性位点(跨膜锌金属酶,前列腺癌细胞表面高表达,比正常组织高100-1000倍)。
分子特性:分子量约85-115 kDa(糖基化效应),纯度≥95%,水溶性良好,兼容缓冲体系(如PBS)。储存需-20℃避光干燥,避免反复冻融;溶解时可加少量DMSO(≤10%)提高溶解性,但需控制比例以避免生物样品损伤。
2. 光学性能
荧光特性:激发波长488-495 nm,发射波长515-535 nm(绿色荧光),量子产率高,光稳定性良好,适合常规荧光显微镜、流式细胞术及共聚焦成像。与近红外染料(如iFluor 790)联用可实现多色成像,降低背景干扰。
光谱优势:绿色荧光易与细胞自发荧光区分,信噪比高;FITC的化学反应活性支持与氨基、羟基等基团共价偶联,扩展应用场景。
3. 核心应用场景
体外实验:用于PSMA阳性细胞(如LNCaP vs. PC3细胞)的流式分选、共聚焦显微镜成像及组织切片染色,验证靶向结合特异性;支持ELISA结合动力学检测(线性范围0.005-0.16 μg/mL)。
活体成像:在小鼠模型中实现30分钟内快速靶向,60分钟时靶本比(TBR)达3.45±0.31,适用于肿瘤生物分布动力学研究、术中导航(如荧光引导手术)及内窥镜检测。
药物研发:作为PSMA靶向药物/纳米载体的验证工具,评估结合活性与细胞摄取效率;用于分子探针开发(如酶促反应路径解析)及多模态成像(联用近红外探针或MRI造影剂)。
高通量检测:支持荧光读板实验、多色流式细胞术及荧光共定位研究,提升检测效率。
4. 制备与操作要点
制备方法:采用Fmoc固相合成法,以Fmoc-Lys(Dde)-Wang树脂为载体,经多步反应(如Fmoc保护基去除、NHS结构形成、肽键构建)引入FITC标记,最终通过HPLC纯化(纯度可达96.12%),质谱验证分子量(M+H⁺=823.2)。
反应条件:偶联反应在pH 7-9的缓冲液中进行,无需催化剂;产物稳定,水溶液/有机溶液中长期保存。
操作规范:全程避光操作,避免强光/强酸/强碱环境;溶液现配现用,控制DMSO比例;标记后需验证探针纯度(如HPLC检测)及信号稳定性。

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