Cyanine 5 Tyramide Conjugates,Cy5酪胺偶联物的介绍
Cyanine 5 Tyramide Conjugates,Cy5酪胺偶联物的介绍
Cyanine 5 Tyramide Conjugates又称为Cy5酪胺偶联物,是一种以近红外荧光染料Cyanine 5为核心,与酪胺分子通过共价键结合而成的荧光标记试剂。这类化合物具有高荧光强度和良好的反应活性,在免疫检测、组织成像以及信号放大体系中具有广泛应用。其制备方法主要包括染料活化、酪胺偶联、产物纯化以及结构表征四个步骤。首先,在染料活化过程中,Cyanine 5染料通常含有羧基结构。将其溶解于无水二甲基甲酰胺或二甲基亚砜中,并在惰性气氛下加入碳二亚胺类活化剂如EDC以及N羟基琥珀酰亚胺NHS。碳二亚胺首先与羧基反应生成中间的活化物,再与NHS结合生成Cyanine 5 NHS酯中间体。该中间体反应活性高,可与含氨基化合物发生缩合生成酰胺键。反应温度通常控制在二十五摄氏度左右,时间约为一到两个小时,体系应保持无水条件以防止水解。其次是酪胺偶联阶段,将酪胺溶解于无水有机溶剂中,加入少量有机碱如三乙胺调节体系的碱性,使氨基保持活性。然后缓慢加入含有Cyanine 5 NHS酯的溶液,二者在室温下反应四到六小时。反应过程中,酪胺分子的伯胺基团与Cyanine 5 NHS酯的活性羧基反应,形成稳定的酰胺键,完成染料与酪胺的共价偶联。反应结束后,通过加入适量缓冲液终止反应,并稀释体系以利于纯化。纯化过程通常采用透析或凝胶过滤去除未反应物质,然后利用高效液相色谱进行精制。纯化过程中可采用乙腈和水体系作为流动相,通过检测六百五十纳米吸收波长来确认目标产物的保留时间并收集主峰组分。经旋转蒸发除去溶剂后可得到高纯度的Cy5酪胺偶联物。所得产物通常为深红色粉末,具有良好的水溶性和光稳定性。产物表征方面,可通过紫外可见光谱确认其吸收峰在六百四十九纳米处,发射峰约为六百七十纳米,说明染料结构保持完整。质谱检测可验证分子量与理论值一致,红外光谱中酰胺键的羰基吸收峰出现在一千六百五十厘米负一附近,而核磁共振分析中可见酪胺芳香环与Cyanine 5结构信号。经HPLC检测,纯度一般可达到百分之九十五以上。通过上述方法获得的Cyanine 5 Tyramide Conjugates既保留了Cyanine 5的高荧光性能,又保留了酪胺的反应活性,可在过氧化物酶催化体系中实现信号放大。其制备过程温和可控,产物具有良好的稳定性与生物兼容性,适用于免疫组织化学、原位杂交以及高灵敏度分子标记等多种生物实验体系,在研究复杂的细胞信号和分子分布时具有重要的应用价值。
产品名称:Cyanine 5 Tyramide Conjugates
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

产品目录
FITC-T7 荧光素标记T7多肽
FITC-TAT-amide 荧光素标记穿膜肽TAT-amide
FITC-TH 荧光素标记响应性细胞穿膜肽TH
FITC-TP-7,Selanc,荧光素标记抗焦虑特性七肽TP-7,Selanc,
仅用于科研,不能用于人体。小编axc