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Cy3 Tyramide,Cy3酪胺的反应的原理

2025-11-11 分享

Cy3 Tyramide,Cy3酪胺的反应的原理

Cy3 Tyramide是一种以Cyanine 3荧光染料为核心并与酪胺结构通过化学键结合形成的荧光标记分子,常用于酪胺信号放大技术中。该分子在光谱上具有典型的橙红色荧光发射特征,吸收峰约在550纳米左右,发射峰约在570纳米左右。Cy3 Tyramide在免疫组织化学、原位杂交和细胞成像实验中具有高灵敏度与低背景信号等优点。其反应原理主要依托于过氧化物酶催化下酪胺分子的自由基反应,使得荧光染料能够特异性地共价结合到目标区域,从而实现信号的空间固定与放大。Cy3 Tyramide的化学反应原理可以从两个方面理解:其一是酪胺信号放大的酶促机理,其二是染料酪胺偶联物形成的化学反应原理。在酶促反应层面,Cy3 Tyramide的工作依赖于辣根过氧化物酶等催化剂的作用。在含有过氧化氢的体系中,酶与过氧化氢反应生成高氧化态中间体,该中间体具有强氧化能力,能够将酪胺结构中的酚羟基氧化为酪胺自由基。此自由基活性很高,可迅速与邻近的蛋白质分子中的酪氨酸残基或其他芳香氨基酸发生自由基偶联反应,生成共价键。由于这种反应发生在酶作用的局部区域,因此Cy3荧光染料会被精确固定在目标位置,实现信号放大并保持定位精度。该过程无需外加光照或额外能量供给,反应温和且特异性高,能够有效地提高检测灵敏度。另一方面,Cy3 Tyramide的化学合成过程基于染料活化与酪胺偶联反应的原理。Cyanine 3染料分子通常含有一个羧基官能团,通过碳二亚胺类化合物如EDC和N羟基琥珀酰亚胺NHS进行活化,在反应中羧基被转化为具有较高反应活性的NHS酯。随后,将含有伯胺结构的酪胺加入反应体系,酪胺的氨基作为亲核体进攻活性酯的羰基,生成稳定的酰胺键,从而形成Cy3 Tyramide偶联物。该缩合反应通常在有机溶剂如无水二甲基甲酰胺或二甲基亚砜中进行,温度控制在二十五摄氏度左右,体系保持无水以防止活性酯水解。反应完成后,通过高效液相色谱纯化,得到纯度较高的Cy3 Tyramide。其结构特点是将荧光染料部分与酪胺功能团相结合,既保持了Cy3染料强烈的荧光性能,又保留了酪胺分子在酶促体系中参与自由基反应的化学活性。该分子的稳定性较好,在中性至弱酸条件下可长期储存,且在水相环境中具有良好的溶解性。Cy3 Tyramide的反应原理使其在信号检测体系中具有重要优势。由于酪胺自由基能够与靶标分子共价结合,信号被牢固固定在检测区域,避免了荧光染料的扩散或流失。相比传统的直接标记方法,Cy3 Tyramide通过酶催化放大可使荧光强度提高数十倍,从而显著改善低丰度蛋白或核酸的检测效果。其反应过程快速、定位准确,不依赖复杂的外界条件,适合在多种生物样品中应用。综上所述,Cy3 Tyramide的反应原理综合了有机化学中的酰胺键生成机制与酪胺自由基偶联机制,既体现了精确的分子设计思想,又展现了高效的信号放大特性,为生物成像与分子检测技术提供了可靠的化学基础。

产品名称:Cy3 Tyramide

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

Cy3 Tyramide

产品目录

FITC-TPP 荧光素标记磷酸三苯酯

FITC-Transferrins 荧光素转铁蛋白

FITC-Transportan 荧光素标记穿膜肽Transportan

FITC-Tuftsin Diacetate  荧光素标记增免疫苏精肽

FITC-UrolithinA  荧光素标记尿石素A

FITC-VP22 荧光素标记穿膜肽VP22

FITC-YTA4 荧光素标记穿膜肽YTA4

仅用于科研,不能用于人体。小编axc