AF488 Tyramide Conjugates的反应机理

AF488 Tyramide Conjugates的反应机理

AF488 Tyramide Conjugates是一种以Alexa Fluor 488荧光染料为核心并与酪胺结构通过化学键结合形成的荧光标记化合物，属于酪胺信号放大体系中常用的荧光探针之一。该分子具有明亮的绿色荧光，吸收峰位于约490纳米，发射峰约为520纳米，兼具高光稳定性与良好的水溶性。其在免疫组化、原位杂交、细胞信号检测及成像分析中具有广泛应用。AF488 Tyramide Conjugates的反应特点主要体现在反应机理、反应条件、反应特异性和反应结果等多个方面，体现出其高效性与选择性。

首先，从反应机理上看，AF488 Tyramide Conjugates的核心反应为过氧化物酶催化下的酪胺自由基偶联反应。在检测体系中，酶如辣根过氧化物酶与过氧化氢反应生成高氧化态的酶复合物，该复合物能选择性地氧化酪胺分子中的酚羟基，生成酪胺自由基。该自由基具有极强的反应活性，会与邻近蛋白质分子中的酪氨酸残基或其他芳香族氨基酸形成共价键。由于反应仅发生在酶所在区域，因此AF488染料分子被精确固定在目标部位，实现信号放大。这种反应的特点是定位准确、速率快且副反应少，使得标记结果稳定而重复性好。

其次，在反应条件方面，AF488 Tyramide Conjugates的使用通常在温和的环境中进行，体系pH值控制在七点二到七点六之间，反应温度维持在二十五至三十摄氏度。反应体系中需含有少量过氧化氢以激活酶催化，而荧光酪胺探针的浓度则根据样品类型进行微调。反应时间一般在十至三十分钟之间即可完成。此类条件具有显著的温和性，不会破坏生物样品的组织结构或抗原表位，同时可有效避免非特异性结合。

从化学反应角度看，AF488 Tyramide Conjugates的形成依赖于前期染料与酪胺分子的偶联反应。Alexa Fluor 488通常以琥珀酰亚胺酯的形式存在，其活性酯结构能够与酪胺分子中的氨基发生缩合反应，生成稳定的酰胺键。该反应在无水有机溶剂中进行，一般选用二甲基甲酰胺或二甲基亚砜作为溶剂，加入有机碱如三乙胺以保持氨基活性。反应条件温和，副产物少，能保持AF488的光学性能不受影响。这一反应特点确保了所得偶联物结构稳定，荧光性能保持良好，并且在后续的酶催化体系中仍具有高反应活性。

AF488 Tyramide Conjugates的反应具有高选择性。其酪胺部分在酶催化下仅与蛋白质中暴露的酪氨酸残基反应，避免了随机标记所带来的信号分散。由于AF488染料具有优良的光稳定性和高量子产率，反应完成后的信号强度明显增强，背景噪声低，信噪比高。这一特点使其特别适合用于复杂生物组织的多重标记实验和精细成像研究。

此外，该反应体系具有高放大效率。酪胺信号放大技术的优势在于，一个酶分子可催化数百个酪胺自由基的生成，使荧光信号呈指数级增强。AF488 Tyramide Conjugates利用这一原理，可以在检测低丰度靶标时仍获得清晰可见的荧光信号。与直接标记法相比，该反应不依赖高浓度探针或长时间孵育，从而减少了非特异结合，提高了检测灵敏度。

反应完成后的产物具有优良的化学稳定性。AF488染料结构中含有共轭体系，能够有效抵御光漂白，而其与酪胺形成的酰胺键则具有较高的化学稳定性，不易被水解或氧化。即使在长期储存或后续染色过程中，信号依旧保持稳定。

产品名称：AF488 Tyramide Conjugates

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

产品目录

FITC-阿霉素，FITC-DOX，

FITC标记环丙沙星 FITC-Ciprofloxacin

FITC标记九聚精氨酸肽 FITC-R9

FITC标记油酸 FITC-Oleic-acid，OA，

FITC刀豆球蛋白A FITC-ConA

FITC-海藻酸钠，FITC-sodium alginate，

FITC-人血清白蛋白，FITC-HSA，

仅用于科研，不能用于人体。小编axc