Casein-FITC Conjugate，酪蛋白-FITC偶联物的合成方法

产品名称：Casein-FITC Conjugate，酪蛋白-FITC偶联物的合成方法

1. 化学特性

荧光特性：FITC为绿色荧光染料，激发波长488-495 nm，发射波长520-525 nm，量子产率高且光稳定性强，适合长时间成像（如活细胞追踪）。荧光强度在酸性条件（pH <6.0）下显著下降，适合中性/弱碱性体系（如细胞质环境）。

分子结构：酪蛋白是磷蛋白，含αs1-、β-、κ-等多种亚型，形成胶束结构，含游离氨基（如赖氨酸残基）。FITC通过异硫氰酸酯基与酪蛋白氨基反应生成硫脲键（-NH-CS-NH-），形成稳定复合物。

物理性质：固体粉末需-20℃以下避光干燥保存；溶液需现配现用，分装保存以避免荧光淬灭。溶于DMSO、水或极性有机溶剂。

2. 应用场景

生物医学研究：

细胞成像与追踪：用于荧光显微镜、流式细胞术、免疫荧光染色，标记细胞表面受体或内部结构（如溶酶体、细胞骨架）。

蛋白酶活性检测：作为蛋白酶（如胰蛋白酶、组织蛋白酶B）的底物，水解后释放荧光信号，通过强度变化定量分析酶活性。

蛋白质相互作用：研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸相互作用，如抗体-抗原结合、受体-配体结合。

药物开发：用于药物递送系统（如靶向纳米载体）、生物标志物检测、肿瘤靶向成像及代谢通路研究。

食品科学：乳制品中蛋白质行为分析、营养物质的生物利用度评估及功能性食品开发。

3. 合成方法

标记过程：在碱性条件（如0.1 M碳酸氢钠缓冲液，pH 8.3-9.5）下，FITC与酪蛋白的氨基反应生成硫脲键。反应需控制温度（室温至37℃）和反应时间（通常2-4小时）。

纯化步骤：通过透析（截留分子量10 kDa）或凝胶过滤（如Sephadex G-25）去除未反应的FITC，确保产物纯度≥95%。

验证：通过荧光光谱（激发/发射波长确认）和质谱（分子量验证）确认标记成功。

4. 生物活性与安全性

生物活性：标记后保留酪蛋白的生物功能（如与受体的结合能力），支持体内外实验准确性。例如，在蛋白酶检测中，荧光强度变化直接反映酶活性。

安全性：虽较传统染料（如溴化乙锭）更安全，但仍属潜在诱变剂，需在通风橱中操作，佩戴手套及实验服，避免直接接触。产品仅限科研使用，禁止用于人体、非药用或食用。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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