ATTO 680 NHS Ester，ATTO 680 活性酯的合成步骤概述

ATTO 680 N‑羟基琥珀酰亚胺酯，也称ATTO 680活性酯染料或ATTO 680 NHS酯，是一种红/近红外荧光染料，其NHS酯衍生物可以与氨基化合物形成酰胺键，用于蛋白质、肽链及其他含氨基的小分子标记。ATTO 680荧光染料具有吸收峰约680 nm，发射峰约700 nm，在水溶液中荧光性质稳定，可用于分子追踪和标记研究。NHS酯结构使其能够在温和条件下与氨基反应生成酰胺键，连接臂提供一定柔性，使染料在标记过程中对分子结构干扰较小，保留目标分子结构和功能特性。合成过程中，ATTO 680羧酸衍生物与N‑羟基琥珀酰亚胺及偶联剂如DCC或EDC反应，将羧酸活化形成中间体，再与NHS反应生成活性酯，反应在无水条件下进行，控制溶剂、温度及时间可保证产物形成，避光操作可减少染料降解。生成的活性酯通过层析或反相高效液相色谱纯化，去除未反应的起始物、偶联副产物及水解生成的羧酸，纯化后产物干燥至固体，储存于低温并避光环境中，配制储备液时使用无水溶剂如DMSO或DMF。化学反应原理为羧酸被偶联剂活化形成中间体，中间体与NHS反应生成NHS酯，该酯在温和条件下与目标分子的氨基反应形成酰胺键，整个过程无需金属催化，条件温和，产物在水相和缓冲液中保持稳定，标记后的分子可用于分子示踪、成像或定量分析。ATTO 680 NHS Ester通过羧酸活化和NHS酯形成获得适用于氨基标记的活性染料，在标记过程中化学结构稳定，可用于多种生物分子标记和荧光分析实验。