四甲基罗丹明染料刀豆球蛋白A的核心应用,TMR-Con A
产品名称:四甲基罗丹明染料刀豆球蛋白A的核心应用,TMR-Con A
1. 组成与特性
Con A(刀豆球蛋白A):从刀豆(Canavalia ensiformis)种子中提取的植物凝集素,分子量约104 kDa,四聚体结构。特异性识别并结合α-D-甘露糖、α-D-葡萄糖残基,常用于检测细胞表面糖蛋白、糖脂的分布及动态变化。
TMR(四甲基罗丹明):红色荧光染料,激发波长548 nm,发射波长575 nm,荧光亮度高、光稳定性好,适合长时间显微成像。
复合物特性:TMR通过共价键(如异硫氰酸酯基团与蛋白质氨基反应)标记Con A,形成稳定的荧光标记物,兼具Con A的糖结合特异性与TMR的荧光信号放大功能。
2. 制备方法
材料准备:Con A溶解于PBS等缓冲液(pH 7.0-7.5),TMR溶解于DMSO或乙醇(高浓度溶液)。
标记反应:将TMR溶液缓慢加入Con A溶液,室温孵育2-4小时,确保染料与蛋白质充分结合。
纯化:通过透析(PBS缓冲液过夜)或凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,获得纯净的TMR-Con A。
储存:-20℃分装保存,避免反复冻融导致活性下降。
3. 核心应用
细胞成像与显微镜:荧光显微镜下观察细胞表面糖蛋白、糖脂的分布,如肿瘤细胞糖基化异常、细胞膜结构研究。
流式细胞术:定量分析细胞表面糖基表达水平,辅助细胞分型、疾病诊断(如癌症、病毒感染)。
糖生物学研究:追踪糖类分子在细胞信号传导、细胞分化、肿瘤转化中的作用,例如研究外泌体表面糖基化修饰。
组织学分析:组织切片中标记特定糖类,用于肿瘤糖谱分析、肝/肾功能评估(如肝脏纤维化、肾脏糖代谢异常)。
药物筛选:筛选与糖基化相关的药物,评估其对糖蛋白-糖相互作用的影响。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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