CF 405M WGA,CF 405M小麦胚芽凝集素的反应步骤
CF 405M WGA,CF 405M小麦胚芽凝集素的反应步骤
CF405M WGA 是将小麦胚芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)与 CF405M 荧光染料通过化学偶联形成的复合分子。WGA 是一种来源于小麦胚芽的糖结合蛋白,能够特异性结合含有 N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)或唾液酸的糖链结构,分子具有较强的生物识别能力。CF405M 是一种蓝色荧光染料,具有芳香共轭结构及活性官能团(如羧基、活化酯或氨基反应位点),可通过共价化学方式与蛋白质分子偶联,使荧光信号稳定附着在 WGA 分子上。偶联后形成的 CF405M WGA 既保持了 WGA 的糖识别特性,又具备稳定可观测的荧光标记,使其在细胞表面糖链标记和生物成像中得到广泛应用。
反应步骤的原理主要包括蛋白质活化、染料活化与偶联以及偶联产物的后处理。首先,WGA 蛋白分子中含有多个赖氨酸残基的氨基和 N 端氨基,这些氨基为偶联提供了主要亲核位点。通过适当的缓冲条件调整蛋白质的溶液状态,保证氨基官能团处于非质子化形式,从而增强其亲核反应性,使后续染料偶联效率更高。
第二阶段是 CF405M 荧光染料的活化及偶联。染料分子通常以活化酯形式存在,能够与蛋白质氨基发生亲核加成反应,生成稳定的酰胺键。具体反应原理为:蛋白质氨基的孤对电子攻击染料活性酯碳原子,形成瞬时加成中间体,随后脱去离去基团,生成共价酰胺键,将荧光染料牢固地固定在蛋白质分子上。这种化学反应具有高度选择性和温和性,保证蛋白质的三级结构和糖结合功能不受显著影响,同时使染料的芳香共轭体系保持光学性能。
偶联反应完成后,通常需要对产物进行后处理,包括去除未反应的游离染料和调节溶液条件,以获得纯净的 CF405M WGA。纯化过程的目标是确保偶联比例适中,使蛋白质分子上荧光染料数量均匀,避免过量染料影响蛋白功能或形成聚集。偶联产物中,CF405M 的刚性芳香结构提供稳定的光学信号输出,而 WGA 蛋白的柔性链段和糖结合区域保持生物识别能力,使分子在应用中能够同时兼具标记功能与识别功能。
CF405M WGA 的反应步骤体现了亲核加成—共价键形成的基本原理,通过赖氨酸氨基与染料活性酯的反应,将荧光信号牢固附着在蛋白分子上。偶联产物具有“两域结构”:一端为荧光染料芳香共轭域,负责光学信号输出;另一端为蛋白质功能域,包括糖结合位点和柔性链段,维持生物识别能力。这种结构组合使 CF405M WGA 能够在细胞表面糖链标记、活细胞成像以及组织荧光染色中表现出高特异性和稳定信号输出。
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产品名称:CF 405M WGA
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
花菁染料CY3标记更昔洛韦 CY3-Ganciclovir
花菁染料CY3标记谷氨酸 Cy3-Glutamic acid
花菁染料CY3标记海藻酸 CY3-Alginate
花菁染料CY3标记环孢素A CY3-Cyclosporin A
花菁染料CY3标记环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽 CY3-cRGD
仅用于科研,不能用于人体。小编axc