AF 700 WGA，AF700小麦胚芽凝集素的反应原理

AF 700 WGA，AF700小麦胚芽凝集素的反应原理

AF700 WGA 是由小麦胚芽凝集素（Wheat Germ Agglutinin, WGA）与近红外荧光染料 Alexa Fluor 700（AF700）通过共价化学偶联形成的复合分子。WGA 是一种来源于小麦胚芽的糖结合蛋白，能够特异性识别含有 N-乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）或唾液酸的糖链结构，其分子具有糖识别功能和较强的生物兼容性。AF700 是一种近红外荧光染料，具有大 π 共轭体系和活性官能团（如羧基或活化酯），可通过共价偶联与蛋白质分子结合。偶联后的 AF700 WGA 分子既保持了 WGA 的糖结合特性，又获得了稳定的荧光信号，使其广泛应用于细胞表面糖链标记、组织成像及多光谱分析。

AF700 WGA 的反应原理主要基于蛋白质氨基与染料活性官能团的共价反应。WGA 蛋白分子中含有多个赖氨酸残基的氨基和蛋白 N 端氨基，这些氨基在适当的缓冲条件下呈非质子化状态，表现出较高的亲核性，是偶联的主要反应位点。AF700 染料的活性基团通常为 NHS 酯或类似结构，能够被蛋白质氨基攻击形成稳定的酰胺键。在反应过程中，蛋白质氨基的孤对电子对染料活性碳中心进行亲核进攻，生成加成中间体，随后离去基团脱离，形成稳定的共价酰胺键，将荧光染料固定在蛋白质分子上。

偶联反应的化学原理具有高度选择性和温和性，这保证了 WGA 蛋白的三级结构及糖结合功能不受显著影响。形成的酰胺键化学稳定，使染料在后续使用过程中保持光学性能，避免荧光信号衰减或染料游离对实验结果产生干扰。通过这种偶联方式，AF700 WGA 分子呈现出典型的“两域结构”：一端为刚性芳香共轭的 AF700，负责稳定的光学信号输出；另一端为柔性 WGA 蛋白，保留糖识别功能及结构适应性。

AF700 WGA 的反应原理还包括偶联位点选择的策略性调控。蛋白质分子中赖氨酸氨基分布广泛，通过调节缓冲液 pH 和反应条件，可控制偶联效率及染料分布，使染料标记均匀，避免过量偶联造成蛋白质活性丧失或聚集。偶联后的分子在溶液中呈分散状态，保持 WGA 的糖识别能力和 AF700 的光学性能，同时在近红外波段提供稳定可观测信号，有利于深组织成像或多光谱实验。

此外，AF700 WGA 的偶联反应机制体现了亲核加成—共价键形成的基本化学逻辑。蛋白氨基作为亲核试剂攻击染料活性碳中心，形成稳定共价键，将染料与蛋白质牢固连接。偶联分子中刚性芳香染料与柔性蛋白结合，使分子既具备光学信号输出功能，又保持与生物体系兼容的柔性和极性，这对于细胞标记、糖链成像及生物分析具有重要意义。

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产品名称：AF 700 WGA

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

花菁染料Cy3标记黄曲霉毒素B1 Cy3-AFB1

花菁染料CY3标记肌动蛋白 CY3-Actin

花菁染料CY3标记甲氨蝶呤 ?CY3-MTX

花菁染料CY3标记甲基四氮杂卓 Cy3-Methyltetrazine 1676067-48-3

仅用于科研，不能用于人体。小编axc