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CY3.5-HA,CY3.5标记透明质酸的纯化和表征

2025-12-05 分享

CY3.5-HA,CY3.5标记透明质酸的纯化和表征

CY3.5-HA 是将花菁染料 Cy3.5 共价标记在透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)分子上的衍生物,结合了 Cy3.5 的远红荧光特性与 HA 的高分子多糖骨架,为生物实验、载体构建及分子示踪提供多功能工具。透明质酸是一种天然高分子多糖,由重复的 N-乙酰-D-葡糖胺和 D-葡糖醛酸单元组成,分子中含有丰富的羟基和羧基官能团,可用于化学修饰和功能化连接。通过 Cy3.5 偶联,标记后的 HA 可在吸收峰约 570–580 nm、发射峰约 590–620 nm 的远红光区发出荧光,实现高灵敏度可视化和定量分析。

CY3.5-HA 的纯化和表征是确保标记成功及分子性能稳定的重要环节。纯化通常采用透析、凝胶过滤或超滤方法,以去除未反应的 Cy3.5、残留偶联试剂及小分子副产物。透析利用分子量差异,将未偶联的小分子染料和副产物排除,而保持高分子量的 CY3.5-HA 在囊袋中。凝胶过滤和超滤则通过分子筛效应,实现快速分离和浓缩,同时保证荧光标记多糖链的完整性和结构稳定性。

纯化后的 CY3.5-HA 需要进行系统表征,以评估偶联效率、荧光性能及分子完整性。紫外-可见光谱(UV-Vis)和荧光光谱是最常用的方法。UV-Vis 光谱可显示 Cy3.5 的吸收峰,同时通过比较未标记 HA 与标记后的吸光变化,间接推算偶联程度。荧光光谱测定可确认 Cy3.5 的发射特性及荧光强度是否受到多糖链环境的影响,从而评估标记分子在实验条件下的可视化能力。

此外,可通过高效液相色谱(HPLC)或凝胶渗透色谱(GPC)分析分子量分布和纯化效果。标记后的 HA 分子通常保持高分子量特性,但偶联过程可能引入轻微聚集或链长度变化,通过 GPC 可直观评估分布均匀性和分子完整性。核磁共振(NMR)和傅里叶变换红外光谱(FTIR)也可用于验证 Cy3.5 与 HA 的化学连接,观察羰基、酰胺键或芳香环的特征信号,进一步确认偶联成功。

在表征过程中,溶液稳定性也是关键指标。CY3.5-HA 在水相或缓冲液体系中应保持均匀溶解,不发生明显聚集或荧光猝灭。通过动态光散射(DLS)可评估标记 HA 的水溶性粒径及分散性,保证其在生物实验或材料应用中具有良好性能。荧光稳定性测试可以评估标记分子在光照或温和条件下的稳定性,为长期实验和存储提供参考。

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产品名称:CY3.5-HA,CY3.5标记透明质酸

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

CY3.5-HA

产品目录

水溶性花菁染料CY3标记叠氮 Sulfo-CY3-N3

水溶性花菁染料CY3标记二苯并环辛炔 Sulfo-Cy3-DBCO

水溶性花菁染料CY3标记二苯并环辛炔 Sulfo-Cy3-DBCO 1857352-95-4

水溶性花菁染料CY3标记腐胺 Sulfo-Cy3-cadaverine

仅用于科研,不能用于人体。小编axc