CY3.5-Hyaluronate，CY3.5标记透明质酸的合成步骤

CY3.5-Hyaluronate，CY3.5标记透明质酸的合成步骤

CY3.5-Hyaluronate 是将花菁染料 Cy3.5 共价标记在透明质酸（Hyaluronate, HA）分子上的衍生物，结合了 Cy3.5 的远红荧光特性与 HA 的水溶性多糖骨架，为分子示踪、载体构建和材料化学提供多功能工具。透明质酸是一种天然高分子多糖，由重复的 D-葡糖醛酸和 N-乙酰-D-葡糖胺单元构成，分子中含有丰富的羧基和羟基，可用于化学修饰和功能化连接。通过 Cy3.5 偶联，标记后的分子可在吸收峰约 570–580 nm、发射峰约 590–620 nm 的远红光区发出荧光，实现高灵敏度可视化。

CY3.5-Hyaluronate 的合成步骤通常包括羧基活化、荧光团偶联和纯化三个主要阶段。首先，HA 分子中的羧基官能团通过偶联试剂活化。常用方法是使用水溶性 EDC（1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐）和 NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）或 sulfo-NHS，在水相缓冲液中形成活化酯中间体。该中间体具有高度亲电子性，为 Cy3.5 的氨基或肼基提供反应位点。活化步骤通常在 pH 5–7.5 的缓冲体系下进行，以确保羧基充分活化且荧光团在反应中保持稳定。

接下来是荧光团偶联阶段。Cy3.5-NH₂ 或 Cy3.5-hydrazide 作为亲核试剂进攻 HA 活化羧基中间体的碳原子，形成过渡态后离去基团脱离，生成稳定的酰胺键或肼键，实现 Cy3.5 与 HA 的共价结合。为了避免空间阻碍和荧光猝灭，通常在 Cy3.5 与 HA 之间引入柔性连接子，使荧光团与多糖链保持一定距离，同时提高偶联效率和荧光稳定性。反应温和控制在室温至 25°C，可保护 HA 分子链结构和 Cy3.5 荧光团。

偶联完成后，CY3.5-Hyaluronate 需进行纯化，以去除未反应的 Cy3.5、残余活化试剂和副产物。常用纯化方法包括透析、凝胶过滤或超滤。透析利用分子量差异将小分子杂质排除，而保留高分子量的标记 HA。凝胶过滤和超滤可快速分离并浓缩产物，同时保持荧光性能和分子完整性。

纯化后的 CY3.5-Hyaluronate 通常通过紫外-可见光谱（UV-Vis）和荧光光谱表征标记效率及荧光性能，HPLC 或 GPC 用于分析分子量分布和聚集状态，NMR 和 FTIR 可验证化学偶联是否成功。动态光散射（DLS）可评估水溶性分散性和粒径均一性，确保分子在水相体系或载体体系中的稳定性。

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产品名称：CY3.5-Hyaluronate 

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

水溶性花菁染料CY3标记甲基四氮杂卓 Sulfo-Cy3-Methyltetrazine

水溶性花菁染料CY3标记链霉亲和素 Sulfo-Cy3-Streptavidin

水溶性花菁染料CY3标记马来酰亚胺 Sulfo-Cy3-MAL

水溶性花菁染料CY3标记巯基 Sulfo-CY3-SH

仅用于科研，不能用于人体。小编axc